小鼠腦膜細胞提取物【Mouse Brain: Normal Meningeal Cells Derivatives】

小鼠腦膜細胞提取物是從小鼠原代腦膜細胞提取的，小鼠原代腦膜細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

金黃色葡萄球菌腸毒素B（SEB）單重熒光PCR檢測試劑盒4817-Acetyloxy-chloroα-chloromethylpregna,6-diene,-dione171838醋酸環(huán)丙氯地孕酮

A組鏈球菌單重熒光PCR檢測試劑盒4817-Hydroxya,2a-methylenepregna,6-diene,-dione acetate2

流感嗜血桿菌單重熒光PCR檢測試劑盒484-(Phenylthio)benzyl alcohol63176

肺炎鏈球菌單重熒光PCR檢測試劑盒48Fenticonazole nitrate731519硝酸芬替康唑

嗜肺軍團菌單重熒光PCR檢測試劑盒482-Fluoroadenosine1468
humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4  度：98.0%

HumanPeussioxin，PTELISAKit人百日咳(PT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,5-Pentanediol diacrylate  中文名：  分子式：C11H16O4 

Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,5,15-Tri-O-methylmorindol  942609-65-6  中文名：  分子式：C18H16O6 

HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene  中文名：1,4-雙(5-苯基-2-惡唑基)苯  分子式：C24H16N2O2 

HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  18-Hydroxytritriacontan-16-one  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%
五味子酯乙 HPLC≥98% 20mg Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西貝母堿 HPLC≥98% 20mg Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西貝母堿苷 HPLC≥98% 10mg Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西伯利亞遠志口山酮B HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西伯利亞遠志糖A HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西伯利亞遠志糖A HPLC≥95% 20mg humanherpesvirusesRFLP基因分析試劑盒20

西紅花苷 鑒別 20mg HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西紅花苷I HPLC≥98% 20mg Humanhistatin5ELISAKit 人富組蛋白(histatin5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西紅花苷II HPLC≥98% 20mg HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

西紅柿堿 HPLC≥98% 10mg HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠腦膜細胞提取物說明書熱休克蛋白 27(HSP27)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Panaxydiol  中文名：  分子式：C17H24O2 

曲拉通X-100   100ml  3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

羥自由基檢測   Hydroxyl radical detection  Rasagiline mesylate  中文名：甲磺酸雷沙吉蘭  分子式：3S 

羥脯酸測試前處理試劑   Preeatme reage hydroxyproline test  Rengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4 

羥脯酸（Hyp）測試盒   Glamine syhetase (GS) test kit                 Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4