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人呼吸道組織提取物說明書

人呼吸道組織提取物說明書
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),人呼吸道組織提取物說明書質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
  人呼吸道組織提取物說明書的詳細(xì)資料:

人呼吸道組織提取物【Airway: Normal Human Airway Derivatives

呼吸道并不僅僅是氣體的通道,能對(duì)進(jìn)入的氣體進(jìn)行處理,達(dá)到肺部氣體的溫暖、濕潤(rùn)、清潔。公司科技提供來自新鮮或冷凍人呼吸道組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRBHIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

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人呼吸道組織提取物說明書

Airway: Normal Human Airway Derivatives

EYX99310

 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):

1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng):

1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

λDNA /Hind Marker2ul(次)Trehalose9海藻糖

2ul×(0次)Chlorogenic acid3277綠原酸

DNA MarkerⅠ(for PAGE2ul×4Ethyl rutinoside1875397蕓香糖乙苷

2ul×支18-Hydroxytritriacontan6-one971912

bp Ladderfor PAGE2ml×4Mannitol695甘露醇
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  947529-92-2  中文名:  分子式:C20H36O3  度:97.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit              

Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  60263-06-1  中文名:  分子式:C10H12O4  度:關(guān)鍵詞:  千里光屬; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit  

Ethopabate  1959/6/3  中文名:乙氧酰胺苯甲酯  分子式:C12H15NO4  度:99.0%      小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISAKit  

Estrone  53-16-7  中文名:雌酮  分子式:C18H22O2  度:99.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISAKit  

Estradiol-3-benzoate-17-butyrate  63042-18-2  中文名:雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯  分子式:C29H34O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠B因子(BF)ELISAKit
沙苑子苷A HPLC98% 20mg Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISA試劑盒人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鯊肌醇 HPLC98% 20mg Human3-Niotyrosine,3-ELISA試劑盒人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

山茶甙A HPLC98% 20mg Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

山茶甙B HPLC98% 20mg Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISA試劑盒人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ HPLC98% 20mg Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

山柑子堿 HPLC98% 20mg Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISA試劑盒人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

山梗菜堿 HPLC97% 20mg Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

山姜素 HPLC98% 20mg HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 人酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

山椒子烯醇 HPLC98% 10mg HumanAcidPhosphatase,ACPELISA試劑盒人酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

山椒子烯酮 HPLC98% 10mg Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
人呼吸道組織提取物說明書兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式:C34H42O19 

兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名:  分子式:C11H7ClN4O2  度:98.0%

兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   兔骨保護(hù)素試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔骨保護(hù)素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨保護(hù)素試劑盒、兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名:  分子式:C9H14O4 

兔骨保護(hù)素<破骨細(xì)胞抑制因子>   英文名稱:   Rabbit Osteoprotegerin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   OPG  4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名:  分子式: 

兔骨保護(hù)素(OPG)ELISAKIT     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名:  分子式:C20H26O4

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 人呼吸道 組織提取物
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