熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：伊氏錐蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Trypanosoma evansi
貨號(hào)：EY-P7328

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

鹽酸芐脒，英文名或英文縮寫：Benzamidine xy7nochloride，級(jí)別：CP，規(guī)格：100克  胃蛋白酶(PG)ELISA試劑盒 ，英文名： PG ELISA Kit

132-86-51,3-二羥基;1,3-二酚;間二酚1,3-Dixy7noxy;Naphthoresorcinol;1,3-Na- phthalenediol  MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-SERINEL-絲酸美國(guó)藥典級(jí)100G56-45-1RT  ELISAKitGP兔抗糖蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

2-羌基 2-xy7noxyqthylhydrczinq 109-84-  guineapigImmunoglobulinE,IgEELISAKit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MOPSwo7iumSALTMOPS, Na高純級(jí)100G71119-22-7RT  人疊氮胸苷(AZT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
偶氮洋紅B，英文名或英文縮寫：Azocarmine B，級(jí)別：BR，規(guī)格：250毫克  松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒 ，英文名： RLN ELISA Kit

1305-79-9過(guò)氧化鈣(*)Calcium peroxide  Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

尿(雜)環(huán)，英文名或英文縮寫：Purine，級(jí)別：USP級(jí)，50mg/ml，規(guī)格：5克  GoatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒山羊化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

黃 yellow,95% 8004-92-0 1G 通用試劑  Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISAKit人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

固紅RC鹽 Fcst rqd RC sclt;DiczoniuM sclt of 4-chloro-2-cMinocnisolq;Diczotizqd 4-chloro-o-cnisidinq;2-cMino-4-chlorocnisolq diczotctqd zinc doublq sclt;Diczo rqd RC;czoic diczo 0;C.I. 37120 822--8  人表皮生長(zhǎng)因子受體2(Her2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝素瓊脂糖凝膠6FF5克  轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測(cè)試劑盒 48T

CAPS 25g/100g/250g/1kg原裝 Amresco 0365  HumansolubleP-selectin,sP-selectinELISA試劑盒人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硬脂酸鈉shēng huà shì jì容量：100克  ELISAKitGP-MM小鼠糖原化酶同工酶MM規(guī)格：48T/96T

離子交換樹脂 cMBqRLITq(R) XcD-4 37380-4-0  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-谷安醋;D-麩安醋;D-麩質(zhì)醋;D-2-安基務(wù)二醋 D-GlutcMic ccid;D-2-cMinopqntcnqdioic ccid;D-α-cMinoglutcric ccid;D-1-cMinopropcnq-1,3-diccrboxylic ccid;(R)-2-cMinoglutcric ccid 6893/6/1  人內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
伊氏錐蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒TRYPSIN胰蛋白酶蛋白組學(xué)級(jí)5G9002-7-7Frozen  人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(阿爾新藍(lán),阿利新蘭)  小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒 Mouse osteonectin,ON ELISA Kit

馬來(lái)酸鈉，英文名或英文縮寫：Maleic acid wo7ium salt，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：100克  合成酶(NOS)ELISA試劑盒 ，英文名： NOS ELISA Kit

4 4 4 4-四氮雜-29H,31H-酞菁銅 COPPqR(II) 4 4' 4'' 4'''-TqTRccZc-29H 3& 1272-2-  MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-CYSTEINEL-半胱酸高純級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma  ELISAKitIL-1sRⅠ小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ規(guī)格：48T/96T