人肺大靜脈組織提取物【Lung: Normal Human Lung Vein Derivatives】

肺位于胸腔內(nèi)，主要包含內(nèi)皮，上皮，成纖維三種細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人肺大靜脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

λ DNA0μg 3β-Hydroxyergost-en-one1567679

Anti-c-Myc抗體   μl 3β-Acetoxyα-androstan7β-ol03-乙?；?alpha;-雄烷二醇

Anti-Flag抗體   μl 3β,5α-Dihydroxyergosta,22-dien-one148587

Anti-GST單克隆抗體   μl 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta,22-dien-one881914

Anti-His單克隆抗體   μl3-tert-Butoxycarbony-(4-anisyl)-phenyl-oxazolidinecarboxylic acid19645
Estrone  53-16-7  中文名：雌酮  分子式：C18H22O2    HumanPepsin，PPELISAKit人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Cynatratoside A  97399-96-7  中文名：白薇苷A  分子式：C28H40O8    兔子巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名：  分子式：C38H60O12    Human signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名：  分子式：C44H70O16    Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/ai-RA33-aibody,hNP/RA33ELISAKit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Prosapogenin A  19057-67-1  中文名：薯蕷次皂苷A  分子式：C39H62O12    Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽  Saxagliptin HCL  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG95%）  EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract  質(zhì)量規(guī)格：茶多酚≥98%，EGCG≥95%，≤0.1% 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesB,Gzms-BELISAKit 96T/48T

達沙替尼一水合物  Dasatinib Monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)  大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit

依西美坦  Exemestane (USP)  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,Aromatase inhibitor 大鼠可溶性CD14(sCD14)試劑盒 Rat soluble cluster of differeiation 14,sCD14 ELISA Kit

依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Exemestane  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠可溶性CD23(sCD23)試劑盒 Rat soluble CD23,sCD23 ELISA Kit

  Amidopyrine/aminopyrine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR 大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit

血管緊張素II  Angiotensin II  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR 大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit

維生素 D3 ((膽骨化醇)  Vitamin D3  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4000萬IU/g 大鼠可溶性CD80(sCD80)試劑盒 Rat Soluble Cluster of Differeiation 80,sCD80 ELISA Kit

帕唑帕尼鹽酸鹽  Pazopanib HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)  大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒 Rat soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit

噻托銨  Tiotropium bromide anhydrous   質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR,無水物 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 Rat soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit
人肺大靜脈組織提取物兔固（ALD）ELISA試劑盒     5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  關(guān)鍵詞：  紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  關(guān)鍵詞：  千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。