
參數(shù)規(guī)格: 產(chǎn)品名稱:尼氏單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 英文名稱:Haplosporidium nelsoni 貨號(hào):EY-P6787 產(chǎn)品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。 熒光定量PCR試劑盒技術(shù): 本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增; 2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘; 3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。 在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 特異性熒光標(biāo)記: TaqMan法 TaqMan探針的特性: (1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q) (3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開,發(fā)熒光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針 相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量: 內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。 相對(duì)定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi) 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、計(jì)算表達(dá)水平比率: 2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
 小鼠細(xì)胞分離液500克 RabbitIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 109-69-3錄代正丁烷1-Chlorobutane HumanAi-smoothmuscleaibody,ASMAELISA試劑盒人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 嶙鎢酸鈉100毫克保存:-20℃ Humanc-junELISAKit人c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 乙二醇二 Ethylene glycol dimethyl ,99.5% 110-71-4 100ML 通用試劑 人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ?;侨パ跄懰徕c/?;敲撗跄懰徕c/Sodium taurodeoxycholat ACS,95% 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒 Rabbit ai-glycoprotein aibody,GP ELISA Kit 葡聚糖T500500u保存:-20℃ Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 5256-79-1PSS-辛基本基取代物Octapxenylsilsesquioxane HumanCreatineKinase,CKELISA試劑盒人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬血清(無(wú)菌)shēng huà shì jì容量:RT25克 組織DNA損傷彗星*熒光檢測(cè)試劑盒20次 噠螨靈 Pyridaben 96489-71-3 250MG 通用試劑 Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T L-炳安醋 L-clcninq;(S)-2-cMinopropionic ccid;L-2-cMinopropionic ccid 26-41-7 豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ3 ELISA Kit 甲蝶呤,英文名或英文縮寫:MTX,級(jí)別:USP級(jí),779u/mg,規(guī)格:1克 humanexcisioepaircross-complemeationgroup1,ERCC1ELISAKit人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 16629-19-91吩-2-磺酰錄2-Thiopxenesulfonyl chloride 牛的牛小腸堿性酶(CIAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 SOLVENT142HT溶劑 142 HT試劑級(jí)無(wú)色液體RTsigma 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(AIL-R3)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 3,AIL-R3 ELISA Kit 2,6-二 2,6-Difluoro,98% 437-81-0 5G 通用試劑 1脂酰絲酸(PS)ELISA試劑盒 ,英文名: PS ELISA Kit 硫化/方礦/硫化晶體/Lead(II)sulfide SP 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 RatBladdeumoraigen,BTAELISA試劑盒大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 尼氏單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒本試劑1米 冰凍切片免疫熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒(含熒光二抗)20次 (DL-蘋果酸) Ratai-redcellaibodyELISA試劑盒大鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 二本基聯(lián)本胺shēng huà shì jì容量:2~8℃10毫升 小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 加醋 ChroMiuM Picolinctq 14639-2-9 Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 聚乙二醇 20000 Poly(ethylene glycol) 20,000 (PEG 20000) 25322-68-3 500G 通用試劑 Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線; (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 |