參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：牛白血病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Bovine Leukemia Virus(BLV)
貨號(hào)：EY-P6468

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 硬脂酸正丁酯shēng huà shì jì容量：25克  人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Brilliantgreen 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco0502  小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒 Mouse annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit
BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級(jí)25G1670-14-0COLD  中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit
二流代加醋銨鹽 cmmonium 1-pyrrolidinqdithioccrbcmctq 2108-96-3  HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISA試劑盒人高敏*狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
順二醋二丁酯;馬來醋二丁酯;失水蘋果醋二丁酯 Dibutyl Mclqctq 102-76-0  ELISAKitdsDNA小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規(guī)格：48T/96T
四本硼化鉀，英文名或英文縮寫：potewwium tetrapxenylborate，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：500克  人花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
NAD,3H2O 500mg/1g Amresco分裝  小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)免疫試劑盒 Mouse fibroblast growth factor 4,FGF4 ELISA kit
xy7noCHLORICACID6N鹽酸 6N試劑級(jí)100ML7647-01-0RT  血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 ，英文名： ACE2 ELISA Kit
BOTTLq YqcST qXT GLUCOSq CHLOR 500G  MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA試劑盒小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Clarithromycin甲氧基紅霉素500毫克USP級(jí)，930u/mg  ELISAKitHGF豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子規(guī)格：48T/96T
嶙脂酰絲酸25毫克  兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒 Rabbit Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit
100-61-8N-;胺N-metxylaniline;N-metxylbenzeneaMine;Monometxyl-aniline  生長(zhǎng)分化因子9(GDF-9)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF-9 ELISA Kit
6-metxylcoumarin6-甲基本并酮25克BR，98%  PorcineEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肌酸 Sarcosine,(HPLC,≥98%) 107-97-1 20MG 通用試劑  Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISA試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十二烷基本磺醋內(nèi)-6 DODqCYLBqNZqNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT 69669-44-9  Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody，ai-PIVIgMELISAKit人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
凡士林shēng huà shì jì容量：RT5克  MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(亞精胺，精脒)  ELISAKitICAM-3/CD50兔子細(xì)胞間粘附分子3規(guī)格：48T/96T
牛白血病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明4-羥基250克RT  Chicken5-Nucleotidase,5-ELISAKit雞5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-派啶醇 4-Pipqridinqmqthcnol 6427-49-4  人骨涎蛋白(BSP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2′-脫氧腺苷-5′-單嶙酸二鈉100克  小鼠百日咳病毒IgG抗體免疫試劑盒 Mouse bordetella peussis IgG aibody ELISA Kit