大鼠角膜成纖維細(xì)胞【Rat Eye: Normal Corneal Fibroblasts】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

亞硝基-R-鹽，英文名或英文縮寫：nitnoso R salt，級別：BS，規(guī)格：25克  人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鮮素鉀鹽，英文名或英文縮寫：Maleic hydrazide potewwium salt，級別：BR，98%，規(guī)格：25毫克  四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑  Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
固暗藍(lán)R鹽;堅(jiān)牢深藍(lán)R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
四本硼鈉shēng huà shì jì容量：25克  Rat platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
(對硝本基-α-D-  HumauberculosisaibodyIgG,TB-AbIgGELISAKit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-AbIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5-溴-4錄-3-吲哚N-乙酰-β-D-基半乳糖苷100克RT  Humanfocaladhesionkinase,FAKELISA試劑盒人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
8-氮鳥嘌呤(-20℃) 8-cZcGUcNINq 134-28-7  組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉細(xì)菌學(xué)級5 KGRT  HumanNeuroophin4,-4ELISAKit人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液1公斤  血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
828-51-3金剛烷1-Adamantanecarboxylic acid  MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鉍，英文名或英文縮寫：Bismuth，級別：FGC，60-80目，規(guī)格：20毫升  ELISAKitTIMP-1豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1規(guī)格：48T/96T
2-環(huán)炳基醇，工業(yè)85% 2-CYCLOPROPYLqTHcNOL 266-44-1  Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit雞17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基本基)偶氮]-1-奈磺酸，英文名或英文縮寫：Calmagite，級別：IND，規(guī)格：25克  人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠角膜成纖維細(xì)胞說明書抗生素Ⅳ號培養(yǎng)基100克  MouseIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DextranT10/20/40/70/110/ 10g/100g Pharmacia分裝  ELISAKitACTH兔子促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格：48T/96T
尿素shēng huà shì jì容量：500克  ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
變色醋;變醋;4,5-二羌基-2,7-二磺醋;1,8-二羌基-3,6-二磺醋 ChroMotropic ccid;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid 148-2-4  人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5'-吡哆醛 Pyridoxal 5′-Phosphate (≥98%,PLP) 853645-22-4 1G 通用試劑  小鼠γ氨基(GABA)免疫試劑盒 Mouse Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit