人食管癌組織源細胞提取物【Human Cancer: Esophageal Cancer Tissues Cells Derivatives】

人食管癌組織源細胞提取物是從人原代食管癌組織源細胞提取的，人原代食管癌組織源細胞從人食管癌組織制備。人食管癌組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

人副流感病毒4型單重熒光PCR檢測試劑盒48Lynestrenol526利奈孕醇

（HCoV）通用單重熒光PCR檢測試劑盒48Norethindrone682炔諾酮

（SARS）單重熒光PCR檢測試劑盒48Allylestrenol432-烯丙雌醇

（HKU）單重熒光PCR檢測試劑盒48Estradiol diproppionate1138二雌二醇

（OC43）單重熒光PCR檢測試劑盒48Estradiol-benzoate7-butyrate6428雌二醇-苯甲酸7-丁酸酯
Methyl chlorogenate  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9    豬白介素1αelisa試劑盒   豬白介素1α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白介素1α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素1α試劑盒、豬白介素1αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Methyl 4-O-feruloylquinate  中文名：  分子式：C18H22O9    豬γ干擾素elisa試劑盒   豬γ干擾素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬γ干擾素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬γ干擾素試劑盒、豬γ干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H14O2    豬白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  

Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H13BrO2    豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒  

Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  中文名：  分子式：C7H10O3    豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
鹽酸普羅帕酮  Propafenone Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-2 ELISA Kit

呫噸酸（標準品）  Xanthene-9-carboxylic acid  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-3 ELISA Kit

呫噸酮（標準品）  Xanthone  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查用 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甲基丁香酚（標準品）  Methyl eugenol  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-4 ELISA Kit

香葉醇（標準品）  Geraniol  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-5 ELISA Kit

（標準品）  Benzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠水通道蛋白9(AQP-9)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-9 ELISA Kit

卡維?。藴势罚?/span>  Cavidine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠絲切蛋白1(CFL1)ELISA試劑盒 ，英文名： CFL1 ELISA Kit

5-羥色胺鹽酸鹽（標準品）  Serotonin hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ，英文名： STK ELISA Kit

月見草油（標準品）  Evening primrose oil  質(zhì)量規(guī)格：鑒別 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

龍血素A（標準品）  Loureirin A   質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠絲酸轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)ELISA試劑盒 ，英文名： SPINK3 ELISA Kit
人食管癌組織源細胞提取物Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠卵泡休止素   英文名稱：   Mouse Follistatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠叉頭框蛋白O3   英文名稱：   Mouse Forkhead Box protein O3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA試劑盒  

Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脂多糖（LPS）ELISA試劑盒  

Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6  度：%  關(guān)鍵詞：  抗菌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。