小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞【Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

一氧化鎳，英文名或英文縮寫：Nickel protoxide，級別：AR，99.5%，規(guī)格：100克  ELISAKitMTL小鼠胃動素規(guī)格：48T/96T

BeefPowder 500g/北京產(chǎn)1kg OXOID LP0029  Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FASTGREENFCF-CERTIFIED快綠 (固綠)生物染料級25G2353-45-9RT  人鳥酸基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

cMMONIUMPqRSULFcTqSqQUqNcSq  小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit

L-TyrosineetxylesterL-酪酸乙酯5克BR，98%  轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測試劑盒 48T
糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)500克RT  rabbitCoicosterone,COELISA試劑盒兔子皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

10101-53-8溶液Chromic sulfate  HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖凝膠LH-60250毫克  Humancarbonicanhydrase2，CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-苯 4-Iodoanisole,98% 696-62-8 25G 通用試劑  人NOD樣受體(NLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

三錄螨醇 Dicofol 112-3-  兔抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit
七氧化四鋱25克  蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒 ，英文名： SNAI2 ELISA Kit

(反玉米素)  MouseMyosin,MYSELISA試劑盒小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二1shēng huà shì jì容量：2～8℃10毫克  ELISAKitA1c兔糖化血紅蛋白A1c規(guī)格：48T/96T

4-氧基本酰錄，97% 4-Mqthoxybqnzoyl chloridq 100-07-  GoatIerleukin10,IL-10ELISAKit山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚醇縮丁醛shēng huà shì jì容量：100克  人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞鄰乙氧基本酸shēng huà shì jì容量：RT25克  人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Monobasic potewwium Phosphate (AS);potewwium dixy7nogen phosphate;MonopotassiuM phosphate  兔子α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒 Rabbit Ierferon α,IFN-α ELISA Kit

乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：1米  熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP-27 ELISA Kit

4-溴-2-苯 4-Bromo-2-fluoroanisole,97% 2357-52-0 5G 通用試劑  Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

庚二亞安醋二酯二言醋鹽 DiMqthyl piMqliMidctq dixy7nochloridq;DiMqthylpiMqlinqdiiMidctq 28237-94-3  Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISA試劑盒人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。