人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物【Human Placental：Normal Placenta Trophoblast Derivatives】

胚胎滋養(yǎng)層是母親子宮內(nèi)膜和發(fā)育中胚胎之間的營養(yǎng)通路。緊貼在子宮壁的滋養(yǎng)層是胚胎著床*的步驟，隨后形成胎盤。公司科技提供來自新鮮或冷凍人胚胎滋養(yǎng)層組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Western及IP細(xì)胞裂解液   0 ml4-Aminophenylacetic acid119754-基乙酸

Western一抗稀釋液   0ml4-Amino-N-methylphthalimide24-氨基-N-甲基

電轉(zhuǎn)濾紙 薄  4-Amino-N-methylbenzamide627424-氨基-N-甲基苯甲酰胺

紅細(xì)胞裂解液   1 ml4-Aminohippuric acid6184-氨基馬尿酸

麗春紅染色液   0 ml4-Aminobutyric acid1956/12/24-氨基丁酸
Escitalopram oxalate  219861-08-2  中文名：草酸西酞普蘭  分子式：C22H23FN2O5    兔6前列腺素F1aelisa試劑盒   兔6前列腺素F1a試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔6前列腺素F1a試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔6前列腺素F1a試劑盒、兔6前列腺素F1a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4    兔白介素-6(rabbit IL-6)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ilaprazole  172152-36-2  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S    兔白介素-8(rabbit IL-8)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ivermectin B1a  71827-03-7  中文名：依維菌素  分子式：C48H74O14    兔白介素-10(rabbit IL-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Neutral berberine sulfate  316-41-6  中文名：硫酸黃連素  分子式：C20H20NO8S    兔白介素-12(rabbit IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg HumahymosinELISAKit人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七素 HPLC≥98% 20mg Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七皂苷FC HPLC≥98% 20mg Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

三七皂苷Fe HPLC≥98% 20mg Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

三七皂苷Ft HPLC≥98% 20mg humahyroid-stimulatinghormonereceptoraibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

三七皂苷R HPLC≥98% 20mg humahyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit 人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

三七皂苷R(R型) HPLC≥98% 20mg Humahyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七皂苷R(S型) HPLC≥90% 20mg Humaissuefactor，IFELISAKit人組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七總皂苷 HPLC≥70% 20mg Humaissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三十烷醇 GC≥98% 20mg Humaissueinhibitorofmetalprotease1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物價(jià)格兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  1068661-35-7  中文名：6,6'- 二芥子?；崽?/span>  分子式：C34H42O19 

兔緊張素Ⅱelisa試劑盒   兔緊張素Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔緊張素Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     5-Benzyloxyindole  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒              5-Benzyl-1H-tetrazole  中文名：5-芐基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit     5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%

兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。