大鼠滑膜細(xì)胞提取物【Rat Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives】

大鼠滑膜細(xì)胞提取物是從大鼠滑膜細(xì)胞提取的，大鼠滑膜細(xì)胞從正常大鼠滑膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

 總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

磺胺脒ELISA試劑盒N,N'-Bis(salicylidene),3-propanediamine10N,N-雙(亞水楊基),3-丙二胺

磺胺噻唑ELISA試劑盒N,N'-Bis(acetoacetyl)-o-toluidine916N,N'-雙(乙酰乙?；?/span>)

洛美沙星ELISA試劑盒N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide18719N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺

培氟沙星ELISA試劑盒N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide421378N,N-雙(2-氯乙基)對甲苯磺酰胺

青霉素G ELISA試劑盒N-(Quinoxalin-yl)-(quinoxalin-ylamino)benzenesulfonamideNO
HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl D-aspartate  79337-40-9  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  65855-02-9  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3 

Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISA試劑盒人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzylimidazole  中文名：1-芐基咪唑  分子式：C10H10N2 

HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名：  分子式：C9H15ClO3
脫水澤瀉醇F HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISA試劑盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

澤瀉醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去乙酰澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

刻葉紫堇胺 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

()二氫槲皮素 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

桑根酮K HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)桑素 HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

,二甲氧基,','三羥基黃酮 HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小構(gòu)樹醇A HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠滑膜細(xì)胞提取物培養(yǎng)人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit  3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名：異綠原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%

人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit  3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯  分子式：C12H18O2 

人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one  1521197-43-2  中文名：  分子式：C16H15ClN4O 

人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit     2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS 

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit     2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。