以下是A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書的訂購信息： 產(chǎn)品名稱 | 編號 | 分類 | A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書 | EY00P1478 | 核酸檢測試劑盒 |
組成及試劑配制:
1、A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
需要自備的器材：
1．A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 反應(yīng)五要素：
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 卷曲同源物7(FZD7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 卷曲同源物8(FZD8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 卷曲同源物9(FZD9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 卷曲域錨蛋白重復(fù)序列??葡萄膜自身抗原(UACA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞分化關(guān)聯(lián)蛋白(MMA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維甲酸誘導(dǎo)基因1蛋白(RIG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維生素A(VA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維生素B1(VB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維生素B12(VB12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維生素B6(VB6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T 維生素B9(VB9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格： 48T/96T
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒說明書重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白 (His 標(biāo)簽)CTRC ProteinHuman 重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標(biāo)簽)KYNU ProteinHuman 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)CCL7 ProteinHuman 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽)CCL14 ProteinHuman 重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form)ISG15 ProteinHuman 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)CSF2 ProteinHuman 重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽)CAT ProteinHuman 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)AKR1A1 ProteinHuman 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白IL36B ProteinHuman 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)CROT ProteinHuman 重組人 Urokinase / PLAU (activated by trypsin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)PLAU ProteinHuman |
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