產(chǎn)品名稱 | 大鼠腎小球組織提取物 | 英文名稱 | Kidney:Normal Rat Glomerular Derivatives | 貨號 | EYX99459 |
大鼠腎小球組織提取物【Kidney:Normal Rat Glomerular Derivatives】 腎小球為血液過濾器,腎小球毛細血管壁構(gòu)成過濾膜。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠腎小球組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點; 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。 5ml吸頭(用于大龍,百得,Eppendorf移液器)0支/包4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate34797N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-芐脂 5ml吸頭盒1-Benzoylpiperazine1375481-苯甲酰 5ml圓底連蓋離心管0個/包 4-Benzoyloxy-azetidinone2856284-苯甲酰氧基-氮雜環(huán)丁酮 5ml圓底連蓋棕色離心管0個/包 2,2-Bis(3-amino-hydroxyphenyl)hexafluoropropane8355872,2-雙(3-氨基-羥苯基)六氟丙烷 6孔植物水培盒4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide8384654-苯甲酰'-甲基二苯硫醚 Cefotaxime 中文名:頭孢噻肟鈉 分子式:C16H17N5NaO7S2 豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒 Cefixime 中文名:頭孢克肟 分子式:C16H15N5O7S2 豬乙型腦炎病毒抗體IgGELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝 Cefcapene pivoxil hydrochloride 中文名:鹽酸頭孢卡品酯 分子式:C23H32ClN5O9S2 豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 Caudatin 中文名:告達庭 分子式:C28H42O7 豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 Catalponol methylthiomethyl ether 中文名: 分子式:C17H22O2S 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 馬尾柴酸 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin8,IL-8ELISA試劑盒大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 愈創(chuàng)木素 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin9,IL-9ELISAKit大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 黃獨素D HPLC≥95% 20mg RatIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 重樓皂苷VII HPLC≥95% 20mg Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 竹葉椒堿 HPLC≥95% 20mg Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 槐定堿 HPLC≥98% 20mg RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 齒孔醇 HPLC≥95% 20mg Ratiglyceride,TGELISAKit大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 C HPLC≥95% 20mg Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 D HPLC≥95% 20mg RatImmunoglobulinA,IgAELISAKit大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠腎小球組織提取物細胞毒 T 細胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Araliadiol 1354638-93-9 中文名: 分子式:C15H20O2 度:% 關(guān)鍵詞: 抗癌; 食用土當(dāng)歸; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 細胞凋亡抑制因子BCL-2 英文名稱: Cell appoptosis inhibitory BCL-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BCL-2 Antipyrine 60-80-0 中文名:安替比林 分子式:C11H12N2O 度:99.0% 細胞凋亡相關(guān)基因 -2(BCL-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender Anthraquinone-2-carboxylic acid 117-78-2 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒 100次 Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt 853-35-0 中文名:蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽 分子式:C14H6Na2O8S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 細胞凋亡(TdT介導(dǎo)的原位末端切口平移雙標(biāo)記法)檢測 Vitamin E (VE) detection Averantin 中文名: 分子式:C20H20O7 度:% 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 |