人脂肪細(xì)胞提取物【Human Fat: Normal Adipose Cells Derivatives】

人脂肪細(xì)胞提取物是從人原代脂肪細(xì)胞提取的，人原代脂肪細(xì)胞從正常人脂肪組織制備。正常人脂肪組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗。

犬腺病毒1型實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒Oxytetracycline hydrochloride586鹽酸土霉素

犬腺病毒2型實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒Oxymetholone4347康復(fù)龍

犬呼腸孤病毒RT-PCR檢測試劑盒/Oxiracetam626132奧拉西坦

犬副流感病毒RT-PCR檢測試劑盒/Oxaprozin212568奧沙普秦

犬副流感病毒實(shí)時熒光RT-PCR檢測試劑盒Oxandrolone539氧甲氫龍
Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  114772-34-8  中文名：  分子式：C15H14O2    人轉(zhuǎn)錄因子   英文名稱：   Human Engrailed-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EN-2

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  152628-03-0  中文名：  分子式：C12H14N2O2    E選擇素   英文名稱：   Human E selectin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ES

Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2    上皮鈣粘蛋白   英文名稱：   Human E.cadherin   規(guī)格：   48T/96T   

Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3    內(nèi)皮素受體A   英文名稱：   Human Endothelin Receptor A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EA

Norandrostenedione  734-32-7  中文名：19-去甲-4-雄烯二酮  分子式：C18H24O2    人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit
鹽酸哌唑嗪  Prazosin HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT

醋酸潑尼松龍  Prednisolone acetate  質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP,BR 大鼠壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)試劑盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit

醋酸潑尼松  Prednisone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(AIL)試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit

醋酸潑尼松（標(biāo)準(zhǔn)品）  Prednisone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(AIL-R1)試劑盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit

普瑞巴林  Pregabalin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,S構(gòu)型 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(AIL-R3)試劑盒 Rat AIL R3 ELISA Kit

鹽酸丙卡巴肼/鹽酸甲基芐肼  Procarbazine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(AIL-R4)試劑盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit

鹽酸丙卡巴肼(標(biāo)準(zhǔn)品)  Procarbazine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠壞死因子誘導(dǎo)蛋白6(TSG-6)試劑盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit

鹽酸丙卡特羅  Procaterol HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CP2005,半水合物 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T

丙泊酚  Propofol  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,熔點(diǎn)18 大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA檢測試劑盒RatCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T

鹽酸雷洛昔芬  Raloxifene HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA檢測試劑盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
人脂肪細(xì)胞提取物說明書α-Spinasterol acetate  中文名：α-菠甾醇乙酸酯  分子式：C31H50O2    血清鐵檢測   Copper blue protein (CP) detection

α-Spinasterol  中文名：α-菠甾醇  分子式：C29H48O    總鐵結(jié)合力（TIBC）檢測   5 'nucleotide enzyme (5' ) detection

α-Lipoic acid  中文名：α-硫辛酸  分子式：C8H14O2S2    銅蘭蛋白（CP）檢測   Glamate detection              

α-Lapachone  中文名：  分子式：C15H14O3    游離脂肪酸含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

α-D-Glucose  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6    脂肪酶（LPS）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣