PrimaCell™小鼠膀胱平滑肌細胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法；
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項；

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項；

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

持久型ECL印跡化學發(fā)光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2  26342-66-5鬧羊花III規(guī)格  Rhodojaponin-III

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  69884-00-0擬人參皂苷F11  Pseudoginsenoside F11

小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit  98474-78-3擬人參皂苷RT5說明書  Pseudoginsenoside RT5

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA檢測試劑盒MouseSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T  1180-71-8檸檬苦素品牌  Limonin

人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)試劑盒 Human Legionella aibody IgM,LP Ab-IgM ELISA Kit  20362-31-6牛蒡子苷規(guī)格  Arctiin
497-76-7熊果苷  Arbutin  植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10

491-80-5鷹嘴豆芽素A品牌  Biochanin A  植物細胞染色體分離試劑盒20

491-80-5鷹嘴豆芽素A  Biochanin A   植物細胞內(nèi)氧化應激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒50

491-70-3木犀草素品牌  Luteolin  植物細胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20

491-67-8黃芩素規(guī)格  Baicalein   植物細胞壁束縛酸性蔗糖轉化酶(acidinvease)活性比色法定量檢測試劑盒(胞壁)20
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Dog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit  97-53-0丁香酚規(guī)格  Eugenol

英文名稱FN纖維連結蛋白規(guī)格：96T/48T  530-57-4丁香酸  Syringic acid

腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)亞甲基藍(METHYLENEBLUE)染色試劑盒50  12777-70-7東北貫眾素說明書  Dryocrassin ABBA

Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA試劑盒大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  531-44-2東莨菪苷品牌  Scopolin

小鼠轉運蛋白1(TNPO1)ELISA試劑盒 ，英文名： TNPO1 ELISA Kit  51-34-3東莨菪堿規(guī)格  Scopolamine
PrimaCell™小鼠膀胱平滑肌細胞試劑盒價格41060-15-5新補骨脂異黃酮說明書  Neobavaisoflavone  載玻片細胞βRUNX3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

41059-79-4知母皂苷AⅢ說明書  Timosaponin A-Ⅲ    載玻片細胞βCOLLAGENI蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

40957-83-3黃豆黃素品牌  Glycitein   載玻片細胞βCOLLAGENII蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

404-86-4辣椒堿規(guī)格  Capsaicin  載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

40437-72-7山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷規(guī)格  Kaempeerol-3-Oglucorhamnoside  載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20