人腹膜毛細血管組織提取物【Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Derivatives】

腹膜是全身面積大、配布復雜、薄而光滑、半透明狀的獎膜，由間皮和少量結(jié)締組織構成，覆蓋于腹、盆腔器官的表面。公司科技提供來自新鮮或冷凍人腹膜毛細血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

TAPSO   g/25g/gKetoprofen2715酮基布洛芬

TDZ/噻苯隆   1g Phenformin hydrochloride8348鹽酸苯乙雙胍

TES   g/25g/gDinitolmide1481二硝托胺

Tetracycline hydrochloride鹽酸四環(huán)素   5g/g Miconazole nitrate228327硝酸咪康唑

Thiamine HCl(鹽酸硫胺素，維生素B1)   25gSulfaclozine25磺胺氯吡嗪
Epirengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4    豬去甲上腺素(NE)ELISAKit  

Epigoitrin  中文名：表告依春  分子式：C5H7NOS    豬緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit  

Epiandrosterone  中文名：表雄酮  分子式：C19H30O2    豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISAKit  

Enrofloxacin  中文名：恩諾沙星  分子式：C19H22FN3O3    豬B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit              

Enalapril maleate  中文名：馬來酸依那普利  分子式：C24H32N2O9    豬去甲上腺素(NE)ELISA試劑盒
肉豆蔻醚(標準品)  Myristicin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標準品 大鼠抑制素A(INH-A)ELISA檢測試劑盒RatInhibin,INH-AELISAKit 96T/48T

卡枯醇  Kakuol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠抑制素A(INH-A)試劑盒 Rat Inhibin A,INH-A ELISA Kit

L-細辛脂素(標準品)  L-Asarinin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA檢測試劑盒RatinhibinB,INH-BELISAKit 96T/48T

吉托皂苷元(標準品)  Gitogenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠抑制素B(INH-B)試劑盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit

異甘草素  Isoliquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,甘草提取 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA檢測試劑盒RatInhibinbindingprotein,INHBPELISAKit 96T/48T

異甘草素（標準品）  Isoliquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit

人參皂苷Re(標準品)  Ginsenoside Re  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)試劑盒 Rat Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISA Kit

人參皂苷F4,人參皂苷Rg4  Ginsenoside F4  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)試劑盒 Rat Acyl-CoA desaturase 1,Scd1/Scd ELISA kit

人參皂苷RK3(標準品)  Ginsenoside RK3  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA檢測試劑盒RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 96T/48T

人參皂苷RH4  Ginsenoside RH4  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒 Rat helicobacter pylori (Hp) aibody (IgG) ELISA Kit
人腹膜毛細血管組織提取物兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒     5-Aminoindole  5192-03-0  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit     5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%

兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  5-Aminoindazole  19335-11-6  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒              5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3 

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit     4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  中文名：4-苯甲?；?/span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式：C17H14N2O2  度：98.0%