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大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)

大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)
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產(chǎn)品特點:
大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
  大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)的詳細資料:

產(chǎn)品名稱

大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)

英文名稱

Skin: Normal Rat Epidermal Derivatives

貨號

EYX99465

大鼠表皮組織提取物【Skin: Normal Rat Epidermal Derivatives

表皮組織是由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠表皮組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

實驗要點及說明;

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點;

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

ml平底螺口離心管(國產(chǎn))/Benzyl carbazate53313肼基甲酸芐酯

ml圓底插口離心管(國產(chǎn))25/ 5-Benzoylpentanoic acid414425-苯甲?;焖?/span>

ml圓底螺口高速離心管 PP6/ 7-Benzyloxyindole28977-芐氧基吲哚

ml圓底內螺口離心管(國產(chǎn))/ N-Benzylcinchonidinium chloride692574N-化辛可寧丁

mm微孔濾膜(國產(chǎn),0.22μm/0.45μm)4,4'-Biphenyldicarboxylic acid784,4'-二甲酸
Catalpalactone  1585-68-8  中文名:  分子式:C15H14O4  度:關鍵詞:  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒  

Carvedilol  72956-09-3  中文名:卡維地洛  分子式:C24H26N2O4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒  

Cardenolide B-1  1318158-89-2  中文名:  分子式:C30H44O8  度:98.0%  關鍵詞:  強心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠尿蛋白(UPELISA試劑盒           

Carbasalate calcium  5749-67-7  中文名:卡巴匹林鈣  分子式:C19H18CaN2O9  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體   英文名稱:   urokinase-plasmingen activator receptor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   uPA-R

Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  921769-65-5  中文名:卡培他濱  分子式:C16H20FN3O7  度:98.0%      小鼠超敏感度促甲狀腺素   英文名稱:   Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   U.TSH
氯美扎酮(標準品)  Chlormezanone  質量規(guī)格:UV法溶出度檢查 小鼠內(ET)ELISA檢測試劑盒Mouseendotoxin,ETELISAKit 96T/48T

氫鈣(標準品)  Calcium hydrogenphosphate dihydrate  質量規(guī)格:UV法含量測定 小鼠內(ET)ELISA試劑盒 ,英文名: ET ELISA Kit

磺胺二甲嘧啶 (標準品)  Sulfamethazine  質量規(guī)格:含量測定 小鼠腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA檢測試劑盒MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 96T/48T

磺胺脒(標準品)  Sulfaguanidine  質量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit

芬布芬(標準品)  Fenbufen  質量規(guī)格:含量測定 小鼠腺來源血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit

曲克蘆?。藴势罚?/span>  Troxerutin  質量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠內磺肽α(ENSα)ELISA試劑盒 ,英文名: ENSα ELISA Kit

二羥丙茶堿(標準品)  Diprophylline  質量規(guī)格:含量測定 小鼠內凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒 ,英文名: ITLN1 ELISA Kit

鹽酸地巴唑(標準品)  Bendazol hydrochloride  質量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠內皮素1(EDN1)ELISA試劑盒 ,英文名: EDN1 ELISA Kit

氯喹(標準品)  Chloroquine diphosphate  質量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit

鹽酸異丙嗪(標準品)  Promethazine Hydrochloride  質量規(guī)格:含量測定 小鼠內皮素轉化酶1(ECE1)ELISA試劑盒 ,英文名: ECE1 ELISA Kit
大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Aspergillon A  2239299-08-0  中文名:  分子式:C22H32O  度:98.0%  關鍵詞: 

蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒   48T  Aspergillon A  2239299-08-0  中文名:  分子式:C22H32O 

蝦胺/   英文名稱:   Octopamine   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   OPM  Aspartame  22839-47-0  中文名:阿司帕坦  分子式:C14H18N2O5  度:98.0%  關鍵詞: 

細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Artesunate  88495-63-0  中文名:青蒿琥酯  分子式:C19H28O8  度:98.0%  關鍵詞: 

細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒   48T  Artesunate  88495-63-0  中文名:青蒿琥酯  分子式:C19H28O8

運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

 

產(chǎn)品相關關鍵字: 大鼠表皮 組織提取物
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