人胰腺癌組織源細(xì)胞提取物【Human Cancer: Pancreatic Cancer Tissue Cell Derivatives】

人胰腺癌組織源細(xì)胞提取物是從人胰腺癌組織源細(xì)胞提取的，人胰腺癌組織源細(xì)胞從人胰腺癌組織制備。人胰腺癌組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

曲拉通 X00 Triton X000ml6-O-Feruloylglucose13788756-O-阿魏酰葡萄糖

四甲基 TEMEDmlArillatose B1379415

蔗糖 Sucrose0gCatalponol methylthiomethyl ether143574

十二烷基硫酸鈉 SDS0gEthyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

異丙基-ß-D-硫代半乳糖苷 IPTG5g3-Hydroxycatalponol2656444
Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  109837-85-6  中文名：  分子式：C19H34O3  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物elisa試劑盒   小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  147118-35-2  中文名：  分子式：C31H39O4PSi  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體elisa試劑盒   小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒、小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Methoxydienone  2322-77-2  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰蛋白酶elisa試劑盒   小鼠胰蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠胰蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胰蛋白酶試劑盒、小鼠胰蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Methenolone enanthate  303-42-4  中文名：美替諾龍庚酸酯  分子式：C27H42O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠支原體elisa試劑盒   小鼠支原體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠支原體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠支原體試劑盒、小鼠支原體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Methenolone acetate  434-05-9  中文名：美替諾龍醋酸酯  分子式：C22H32O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
鹽酸羅匹尼羅  Ropinirole HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.0% 大鼠0酸化蛋白激酶B(P-PKB)試劑盒 Rat phosphorylated protein kinase B,p-PKB ELISA Kit

鹽酸羅哌卡因  Ropivacaine hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水合物 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA檢測(cè)試劑盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 96T/48T

鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ropivacaine hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit

瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣  Rosuvastatin Calcium  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠0酸化縫隙連接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)試劑盒 Rat phosphorylated gap junction protein, alpha 1,43kDa(phosphorylated GJA1)ELISA kit

瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rosuvastatin Calcium  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)試劑盒 Rat phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit

西他列汀一水  Sitagliptin phosphate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)試劑盒 Rat phospho glycogen syhase kinase 3,pGSK-3 ELISA Kit

西他列汀一水（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sitagliptin phosphate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 Rat phospho-exacellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit

壯觀霉素,鹽酸大觀霉素  Spectinomycin Hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA kit

壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Spectinomycin Hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 大鼠0酸化胰島素受體(pISR1)試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit

鹽酸坦洛新/鹽酸坦索羅辛  Tamsulosin hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,EP6.5  大鼠0酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit
人胰腺癌組織源細(xì)胞提取物說(shuō)明書(shū)λ噬菌體基因組DNA快速提取試劑盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA  Panaxyne  122855-49-6  中文名：  分子式：C14H20O2  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  細(xì)胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性elisa試劑盒   γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒、γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Tryptophan  中文名：  分子式：C11H12N2O2 

γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）測(cè)定試劑盒（速率法）  Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7 

γ干擾素   英文名稱：   Rabbit γ Ierferon   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IFN-γ  Albendazole  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S 

β-整合素   英文名稱：   β-Iegrin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   β-Iegrin  Wallicoside  88797-59-5  中文名：斷節(jié)參苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

 運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。