大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物【Rat Bladder: Normal Bladder Derivatives】

大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代膀胱上皮細(xì)胞提取的，大鼠原代膀胱上皮細(xì)胞從正常大鼠膀胱組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

呼吸道合胞病毒RNA檢測(cè)試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Tauroursodeoxycholic acid1452?；切苋パ跄懰?/span>

腺病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Taurocholic acid814牛磺膽酸

核酸提取試劑（血清、血漿）48人份/盒、96人份/盒Tapentadol Hydrochloride1755919

丙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)48人份/盒Tanshinone IIB173973丹參酮IIB

結(jié)核分枝桿菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tanshinone IIA5682丹參酮IIA
Humanai-redcellaibodyELISAKit 人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (-)-Mandelic acid benzyl ester  中文名：D-(-)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3  度：98.0%

Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (S)-4-Methoxydalbergione  中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3  度：98.0%

Humanai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISAKit 人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  83558-87-6  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2  度：98.0%   

Humanai-PL7-aibodyELISAKit 人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (Z)-Butylidenephthalide  中文名：  分子式：C12H12O2  度：%

Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit 人PL12抗體/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  209414-27-7  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO  度：98.0%
土貝母苷丙 HPLC≥98% 10mg HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

土貝母苷甲 HPLC≥98% 20mg HumanBigEndothelin,BigETELISA試劑盒人大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土貝母苷乙 HPLC≥98% 20mg HumanBlockingaibody,BAELISA試劑盒人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土大黃苷 HPLC≥98% 20mg Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒人骨堿性0酸酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土槿皮甲酸OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土槿皮乙酸OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISA試劑盒人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土荊皮甲酸 HPLC≥98% 10mg HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISA試劑盒人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土荊皮乙酸 HPLC≥98% 20mg Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA試劑盒人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土克甾酮 HPLC≥98% 20mg HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土木香內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg Humanbrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒人腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒     2-Benzoylbenzoic acid  85-52-9  中文名：2-苯甲酰苯甲酸  分子式：C14H10O3 

人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit     2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人脂蛋白aelisa試劑盒   人脂蛋白a試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂蛋白a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白a試劑盒、人脂蛋白a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-Benzothiazolol  934-34-9  中文名：2-羥基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人脂蛋白a（Lp-a）ELISA試劑盒     2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3  度：98.0%

人脂阿拉伯甘露聚糖elisa試劑盒   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒、人脂阿拉伯甘露聚糖elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-Benzothiazolol  934-34-9  中文名：2-羥基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。