人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Human Lung: Normal Pulmonary Vein Endothelial Cell Derivatives】 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從人原代肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的,人原代肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常人肺大靜脈內(nèi)皮組織制備。正常人肺大靜脈內(nèi)皮組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物 | 英文名稱 | Human Lung: Normal Pulmonary Vein Endothelial Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX98999 |

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 豬偽狂犬病毒(gE基因)PCR檢測(cè)試劑盒/Prilocaine hydrochloride17861鹽酸丙胺卡因 豬偽狂犬病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒Prerubialatin16677189 豬偽狂犬病毒(gE基因)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒Pregnenolone1453孕烯醇酮 豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Pregn-eneβ,17α,S-triol37 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Nsp2 1594~16變異株)RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Pregabalin14855普瑞巴林 Phenformin hydrochloride 中文名:鹽酸苯乙雙胍 分子式:C10H16ClN5 度:98.0% 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒 Dinitolmide 中文名:二硝托胺 分子式:C8H7N3O5 度:98.0% 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒 Miconazole nitrate 中文名:硝酸咪康唑 分子式:C18H15Cl4N3O4 度:98.0% 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Sulfaclozine 中文名:磺胺氯吡嗪 分子式:C10H9ClN4O2S 度:99.0% 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISAKit Cyromazine 中文名:環(huán)丙氨嗪 分子式:C6H10N6 度:98.0% 小鼠Slit2ELISAKit 珠子草素 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin18,IL-18ELISA試劑盒大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大子買麻藤乙素 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 葡萄素 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,'二羥基黃酮 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 龍血素C HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1α,IL-1αELISAKit大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 狗牙花定堿 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1α,IL-1αELISA試劑盒大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ()荷包牡丹堿甲氯化物 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'Z癸二烯?;?/span>)去氧巨大戟萜醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'Z癸二烯?;?/span>)O乙酰巨大戟二萜醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin2,IL-2ELISAKit大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'E癸二烯?;?/span>)O乙酰巨大戟二萜醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物Sibiricose A1 139726-40-2 中文名:6'-芥子?;崽?/span> 分子式:C23H32O15 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Shiraiachrome A 124709-39-3 中文名: 分子式:C30H26O10 度:% 關(guān)鍵詞: 抗生成; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒 Shikonin 517-89-5 中文名:紫草素 分子式:C16H16O5 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 Shikimic acid 138-59-0 中文名:莽草酸 分子式:C7H10O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 莽草; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 Sertaconazole 99592-32-2 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體elisa試劑盒 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒、小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 |