大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Rat Coronary Artery：NormalCoronary Artery Derivatives】

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的，大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常大鼠動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

紅細(xì)胞裂解液1 ml2-Benzothiazolol93442-羥基苯并噻唑

激動素溶液（KT）5×1ml2-Aminothiazol-acetic acid2967612-氨基噻唑-乙酸

吉姆薩染色液 0ml 2-Aminoquinoline522-氨基

麗春紅染色液0 ml2-Aminophenyl phenyl sulfone427382-氨基二苯砜

滅菌水/去離子水0ml2-Aminophenyl phenyl sulfide113442-氨基二苯硫醚
Humanai-IVIgGaibodyELISAKit 人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-Benzylimidazole  中文名：1-芐基咪唑  分子式：C10H10N2  度：98.0%

Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  65855-02-9  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3  度：98.0%   

Humanai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  12-Hydroxyjasmonic acid  中文名：12-羥基酸  分子式：C12H18O4  度：95.5%

HumanAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (1S,2R)-2-Ami,2-diphenylethanol  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：98.0%

Humanai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  17α-Thevebioside  中文名：  分子式：C36H56O13  度：%
頭孢匹林鈉   Cefapirin   質(zhì)量規(guī)格：Content 96.0-102.0%,BR 人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA檢測試劑盒HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 96T/48T

5,7-二氯-8-羥基喹哪啶;氯喹那多  Chlorquinaldol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人褪黑素(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMelatonin,MTELISAKit 96T/48T

癸氧喹酯;乙癸氧喹酯  Decoquinate  質(zhì)量規(guī)格：>99(T) 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit 96T/48T

(S)-2-氨基-5-甲氧基四氫萘鹽酸鹽   (S)-2-Amino-5-methoxytetralin Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA檢測試劑盒HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISAKit 96T/48T

巴馬司他;BB94  Batimastat(BB-94)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑 人脫氧尿三0酸(DP)ELISA檢測試劑盒Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 96T/48T

伊洛馬司他(GM6001)  Ilomastat,GM6001,Galardin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑 人唾液酸(SA)ELISA檢測試劑盒HumanSialicacid,SAELISAKit 96T/48T

愈創(chuàng)木酚縮水甘油醚   Guaiacol glycidyl ether  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人外顯肽(extein)ELISA檢測試劑盒HumanexteinELISAKit 96T/48T

4-氨基安替比林  4-Aminoantipyrine  質(zhì)量規(guī)格：AR,分析 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA檢測試劑盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T

N-代丁二(NBS)  N-bromosuccinimide  質(zhì)量規(guī)格：AR 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA檢測試劑盒Humanadvancedoxidationproteinproducts,AOPPELISAKit 96T/48T

溶葡球菌酶,溶葡萄球菌酶   Lysostaphin  質(zhì)量規(guī)格：BR,5000U/Pack 人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA檢測試劑盒Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISAKit 96T/48T
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物說明書人脂肪酶(Lipase)ELISA試劑盒              2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  中文名：  分子式：C11H7NO4 

人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒     2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4  度：%  關(guān)鍵詞： 

人脂多糖結(jié)合蛋白elisa試劑盒   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒、人脂多糖結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名：  分子式：C10H10O2 

人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit                 2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S 

人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒     2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4