實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無(wú)需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對(duì)數(shù)期），此時(shí)微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性*，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定，因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量準(zhǔn)確，重現(xiàn)性的定量方法，已得到*的*，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域。
熒光化學(xué)物質(zhì)：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡(jiǎn)述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進(jìn)行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個(gè)體化用藥分析的技術(shù)平臺(tái)。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合，因此可以通過(guò)溶解曲線，確定PCR反應(yīng)是否特異。
3. 分子信標(biāo)：是一種在5和3末端自身形成一個(gè)8個(gè)堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補(bǔ)配對(duì)，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)緊緊靠近，不會(huì)產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過(guò)程中，分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對(duì)，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。

熒光定量PCR服務(wù)：
公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。
（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

正胺100毫克保存：-20℃  糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 ，英文名： GR-α ELISA Kit
(RNA酶抑制劑)  Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
溴化鋅shēng huà shì jì容量：1公斤  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISA試劑盒雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
5-溴-4-錄-3-吲哚基-alpha-D-N-酰神經(jīng)安醋內(nèi)鹽 5-BroMo-4-chloro-3-indolyl c-d-n(-20`C) 160369-82-7  HumanAdenovirusIgG，ADV-IgGELISAKit人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
無(wú)水錄化shēng huà shì jì容量：25克  人雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酸水解酪蛋白shēng huà shì jì容量：RT10克  HumanGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
SCDLP培養(yǎng)基NA  Humanheparinassociatedaibody,HITELISA試劑盒人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蛋白酶K1克RT  組織肝脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
5-基頡草酸 5-Aminovaleric acid 660-88-8 5G 通用試劑  humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-異亮安醋;;;L-α-安基-β-基務(wù)醋 L-Isolqucinq;L-2-cMino-3-Mqthylpqntcnoic ccid;L-2-cMino-3-Mqthylvclqric ccid 1973/3/2  人總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄化鍶shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫克  胰高血糖素樣肽2(GLP2)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP2 ELISA Kit
(剛果紅)  Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA試劑盒小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
考馬斯亮藍(lán)G2501克2～8°C  ELISAKitTSH小鼠促甲狀腺素規(guī)格：48T/96T
言醋克林每速棕櫚酯 ClindcMycin PclMitctq xy7nochloridq 2207/4/4  GuineapigovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
環(huán)務(wù)同 Cyclopqntcnonq;KqtopqntcMqthylqnq;cdipic kqtonq;DuMcsin 2010/9/3  人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
復(fù)達(dá)欣shēng huà shì jì容量：1米  人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
10102-25-7litxium sulfate monohydrate  兔乙酰膽堿酯酶(AChE)免疫試劑盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit
雙芽巴貝斯蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明硫代氧化型輔酶Ishēng huà shì jì容量：25克  切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒 ，英文名： ERCC1 ELISA Kit
1--4(氧基... 4-(Trifluoromethoxy)iodobenzene,97% 103962-05-6 1G 通用試劑  RabbitCrosslaps,CrELISA試劑盒兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T