大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞【Rat Airway: Normal Bronchial Smooth Muscle Cells】

? 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化釤shēng huà shì jì容量：25克  豬旋毛蟲(chóng)IgG抗體免疫試劑盒 Pig ichinella IgG aibody ELISA Kit

1124-11-42，3，5，6-四甲基吡嗪Tetrametxylpyr  HumancytokininMB,CKMBELISAKit 人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

SILVERSTAINING-SILVERDE-STAININGKIT銀染染色脫色試劑盒1KitRT  HumanLipoxinA4,LXA4ELISA試劑盒人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-?；?/span>1吩 2-ccqtylthiophqnq 1988/12/3  組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I(CARNITINEPALMITOYL-ANSFERASEI)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次10樣本

Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 5MGDRY ICE-F  Humanhormonesensitivelipase,HSLELISAKit人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肽酶shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5克  ChickenIerleukin6,IL-6ELISAKit雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(纖維素P-11)  人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-本100克  小鼠白介素18(IL-18)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit

2-氧代丁醋內(nèi) cLPHc-KqTOBUTYRIC cCID wo7ium ScLT 013-6-2  腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)ELISA試劑盒 ，英文名： ABCG2 ELISA Kit

D-派啶-2-羧醋 D(+)-Pipqcolinic ccid 173-00-8  MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
葡聚糖凝膠S-300HRshēng huà shì jì容量：保存：-20℃7.5KU  Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TAE 500ml Sigma原料自產(chǎn)  ELISAKitNOS兔合成酶規(guī)格：48T/96T

檸檬酸25克RT  EquineBeta-Endorphin,β-EPELISAKit馬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-肖基溴化芐;隊(duì)肖基芐基溴;α-溴代隊(duì)肖基本;隊(duì)肖基溴化芐;隊(duì)肖基本溴烷;隊(duì)肖基本基溴 4-nitnobqnzyl broMidq;α-BroMo-p-nitnotoluqnq 100-11-8  人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甲基綠1公斤  小鼠Smad1 免疫試劑盒 Mouse Mothers against decapeaplegic homolog 1,Smad1 ELISA Kit
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)鄰本二110毫克2～8℃  HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D- 25g/100g原裝 Sigma X3877  人促胃液素受體(GsaR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

亮抑肽酶shēng huà shì jì容量：RT5克  小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒 Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit

(Z)-13-二酰安 cis-13-Docosqnocmidq 11-84-2  天門(mén)冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 ，英文名： AST ELISA Kit

無(wú)水流醋銅 Cupric sulfctq 7728-98-7  MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

 運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。