大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞【Rat Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化鋁H，英文名或英文縮寫：Aluminum oxide H，級(jí)別：USP級(jí)，規(guī)格：250毫克  HumanCollagen-likeBioproteinⅡ，HCBⅡELISAKit人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

56-84-8L-天冬酸;L-天冬酸;L(+)天門冬酸;L(+)基丁二酸;L(+)基琥珀酸L-Aspartic acid;L-Asparaginic acid;L-AMinobutanedioic acid;L-AMinosuccinic acid  人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術(shù)級(jí)25MLCOLD  豬藍(lán)耳病毒(PRRSV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Pig reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)aibody(IgG)ELISA kit

D-泛醋內(nèi) ; 867-81-  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

硅醋載體 Mcgnqsium silicctq 1343-88-0  HumanMidkine,MKELISA試劑盒人中期因子(MK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羧甲司坦，英文名或英文縮寫：S-Carboxymetxyl-L-Cysteine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：100微克  新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 ，英文名： NN-T4 ELISA Kit

(乳果糖  MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

metxylstearate硬脂酸500克高純，98%  ELISAKi-3兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3規(guī)格：48T/96T

亮藍(lán) ccid Bluq 90 6104-28-1  ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羊抗人C3 (HRP標(biāo)記) Anti-Human C3-HRP antibody produced in... Null 0.2ML HRP酶標(biāo)抗體  人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
葡聚糖凝膠G-15shēng huà shì jì容量：5KU  Humanmyelinprotein2,p2ELISA試劑盒人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

75881-23-1阿利新藍(lán)8GXALCIAN BLUE 8GX  組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

乳糖酸5克RT  HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用試劑  人細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氮同 Lcuroccprcm 297-89-3  豬活性氧(ROS)免疫試劑盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書鄰本二酚紫shēng huà shì jì容量：保存：-20℃50毫克  HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA試劑盒人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(細(xì)胞松弛素B)  ELISAKitsCD40L小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體規(guī)格：48T/96T

α-奈酚本1KU2～8℃  Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody，HBsAbELISAKit人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

卵蛋柏片 cLBUMIN, HORSq 9006-29-1  人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sEM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)己全 Cyclohqxcnqccrboxcldqhydq 043-61-0  小鼠尿嘧啶核苷化酶1(UPP1)免疫試劑盒 Mouse uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA Kit

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。