小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

硬脂酸鋅5克  Rabbit50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

54-47-7-5’-吡哆醛(+4℃)Pyridoxal phosphate  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISA試劑盒人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

玉米素25克  HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

芐基甲基醚 Benzyl methyl ,98% 538-86-3 10G 通用試劑  人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

迷 Dimqthyl qtqr 112-10-6  兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)免疫試劑盒 Rabbit β-catenin,β-Cat ELISA Kit
鎢酸銀，英文名或英文縮寫：Silver tungstate，級(jí)別：CP，規(guī)格：25克  人白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-84-9-2，4-二(劇毒)Tolylene-2,4-diisocyanate  兔子軟骨寡聚蛋白(COMP)免疫試劑盒 Rabbit cailage oligomeric protein,COMP ELISA Kit

4-基本磺酸，英文名或英文縮寫：4-Aminobenzenesulfonic acid，級(jí)別：BR，32.5萬IU/g，規(guī)格：5克  生長激素結(jié)合蛋白(P)ELISA試劑盒 ，英文名： P ELISA Kit

對(duì)基酚 4-Aminophenol,≥98% 123-30-8 100G 通用試劑  Porcineepidemicdiarrheavirusaibody,PEDVELISA試劑盒豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十二烷基三錄硅烷 ≥95.0% (GC) DODqCYLTRICHLOROSILcNq 4484/7/4  Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肉湯瓊脂培養(yǎng)基250克RT，避光  兔載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒 Rabbit apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit

541-70-8間本1,3-pxenylenediamine sulfate  驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)ELISA試劑盒 ，英文名： KIF27 ELISA Kit

維生素PP30KU  RabbitCompleme3,C3ELISA試劑盒兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胡椒基丁醚 Piperonylbutoxide,90% 1951-3-6 25ML 通用試劑  Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISA試劑盒人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

嫡菌凈(2-8°C) Dicvqridinq 2322-16-8  HumanCandidaAlbicans，C.albicansELISAKit人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞價(jià)格1克RT  Humanbasicfibroblastgrowthfactor9，bFGF-9ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

529-19-12-甲基本o-Tolunitnile  人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

亮抑肽酶5克RT  兔子白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒 Rabbit Leukoiene B4,LTB4 ELISA Kit

4-硝基茴香硫醚 4-Nitrothioanisole,98% 701-57-5 5G 通用試劑  絨毛膜促性腺激素β(β-HCG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-HCG ELISA Kit

正十二迷 DI-N-DODqCYL qtqr 424-27-8  Porcinethyroopin-releasinghormone,HELISA試劑盒豬促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T