小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Vein Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

營養(yǎng)肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克  HumanNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(豬源))  HumanMaixGlaProtein,MGPELISA試劑盒人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PROACTMEMBRANESTAIN蛋白膜染色試劑蛋白組學(xué)級1LRT  組織樣品組織蛋白酶D(CATHEPSIND)活性比色法定量檢測試劑盒20次

酰炳同鎳 Bis(2,4-pqntcnqdiono)nickql 364-8-  HumanHeatShockProtein40，HSP-40ELISAKit人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Goldtribromide三溴化金500克AR，98%  人旋毛蟲抗體(ichinella Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鎢棒25克  人1脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(胞嘧啶)  小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)免疫試劑盒 Mouse Chorionic Gonadoophin,CG ELISA Kit

錄化三本四氮唑沙保羅培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升  組蛋白去乙?；?/span>(HDAC)ELISA試劑盒 ，英文名： HDAC ELISA Kit

檸嗪醋;2,6-二羌基異煙醋;2,6-二羌基-4-羧醋;二羌氮本加醋;二縮一酰安檸檬醋 Citrczinic ccid;2,6-Dixy7noxypyridinq-4-ccrboxylic ccid 1999-11-6  Humahyroglobulin,TGELISA試劑盒人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán) Cyclohqxcnol;Hqxcxy7nophqnol 108-93-0  ELISAKitPGF小鼠前列腺素F規(guī)格：48T/96T
日落黃shēng huà shì jì容量：1毫升  小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒 Mouse Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit

1656-48-0β.β氧二2-Cyanoetxyl  綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒 48T

嘌呤25克  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinB,SP-BELISA試劑盒人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二甲基 Dimethylphosphinic acid,97% 3283-12-3 100MG 通用試劑  ELISAKitACH小鼠乙酰膽堿規(guī)格：48T/96T

L-谷安醋;L-麩安醋;L-α-安基務(wù)二醋 L-GlutcMic ccid;(S)-2-cMinoglutcric ccid 26-86-0  HumancoagulationfactorⅫ，FⅫELISAKit人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)100克  ELISAKit5-小鼠5核苷酸酶規(guī)格：48T/96T

Trypsin1:250, 25g Amresco分裝  ChickenIerleukin2,IL-2ELISAKit雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

間本二酸shēng huà shì jì容量：100克  人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4’-羌基本同 4'-xy7noxyccqtophqnonq 99-93-4  小鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒 Mouse low density lipoprotein,LDL ELISA Kit

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA-044shēng huà shì jì容量：500毫克  血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 ，英文名： Hb-AGE ELISA Kit

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。