人胰腺組織提取物 【Human Pancreatic: Normal Pancreatic Derivatives】

胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人胰腺組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

PIP StripspkDiphenhydramine hydrochloride1474鹽酸苯海拉明

Class III PI3K Elisa Kit1ea hydrochloride738鹽酸利多卡因

HyStem®-HP Hydrogel Kit7.5mlLevamisole hydrochloride1659鹽酸左旋咪唑

X-gluc1gVenlaine934139文拉法辛

酸性磷酸酶Acid Phosphatase Microplate Assay Kit0 AssaysVenlafine hydrochloride98鹽酸文拉法辛
Dregeoside Aa1  20230-41-5  中文名：  分子式：C49H78O17    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Tigogenin  77-60-1  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3    Human thymidine phosphorylase (TP) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA試劑盒

Adynerigenin β-neritrioside  88721-09-9  中文名：  分子式：C42H64O17    HumanAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Tenacissoside G  191729-43-8  中文名：通關(guān)藤苷G  分子式：C42H64O14    Humaneosinophilcationicprotein,ECPELISA試劑盒人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6  中文名：  分子式：C42H62O17    組織PKCι激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
去甲基雷諾嗪  Desmethyl Ranolazine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA檢測(cè)試劑盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 96T/48T

雷諾嗪-d3  Ranolazine-d3  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T

雷諾嗪  Ranolazine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 豬組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T

去甲基雷諾嗪β-D-葡萄糖苷酸  Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 總抗氧化能力(TAC)終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒50

(R)-鹽酸樂(lè)卡地平  (R)-Lercanidipine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2A-K5乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等

(S)-鹽酸樂(lè)卡地平  (S)-Lercanidipine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2A-K9乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等

外消旋N-去甲基異丙嗪  rac N-Demethyl Promethazine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2A-T1200酸化檢測(cè)試劑盒10/20等

異丙嗪亞砜  Promethazine Sulfoxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2A-T1290酸化檢測(cè)試劑盒10/20等

4-羥基雷美替胺  4-Hydroxy Ramelteon  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2B-K120乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等

雷美替胺代謝產(chǎn)物M-II (羥基位點(diǎn)R型和S型混合物）  Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 組蛋白H2B-K12乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等
人胰腺組織提取物 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒     6-Ami,3-dimethyluracil  6642-31-5  中文名：  分子式：C6H9N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISAKit     6-Aminoindazole  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒     6-Ami,3-dimethyluracil  6642-31-5  中文名：  分子式：C6H9N3O2 

兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISAKit     7-Benzyloxyindole  中文名：7-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO  度：98.0%

兔中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(rabbit NE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  關(guān)鍵詞：

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。