人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物【Human Bone: Normal Articular Chondrocytes Derivatives】

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物是從人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取的，人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞從正常人關(guān)節(jié)軟骨組織制備。正常人關(guān)節(jié)軟骨組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Prednisone 21-acetate12醋酸潑尼松

豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Nsp2 1594~16變異株）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt15127

高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（JXA1-R株）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Prasugrel13223普拉格雷

豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Pramipexole dihydrochloride46325鹽酸普拉克索

豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Potassium benzylpenicillin1138青霉素鉀
Peri acid  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S    人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit  

Perforatumone  中文名：  分子式：C35H52O5    人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit              

Pentoxyverine   中文名：枸櫞酸噴托維林  分子式：C26H39NO10    中文名稱(chēng)   方法   規(guī)格

Pentagalloylglucose  中文名：五沒(méi)食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26    人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit  

Pemetrexed di  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C21H23N5Na2O6    人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit
蔗糖化酶  Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides  質(zhì)量規(guī)格：BC Grade 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit

磺胺二甲嘧啶鈉(>99%,BP)  Sulfamethazine  salt  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit

磺酞鈉(>98%,BR)  Sulfobromophthalein di salt hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T

Sulfo-MBS  Sulfo-MBS  質(zhì)量規(guī)格：BR 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 ，英文名： VCAM-1/CD106 ELISA Kit

四庚基化銨(>98%,BC)  Tetraheptylammonium bromide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

四丙基氫氧化銨25%溶液  Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution  質(zhì)量規(guī)格：BR 小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T

毒胡蘿卜素(>95% (HPLC),BC)  Thapsigargin, from Thapsia garganica  質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC 小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-1 ELISA Kit

硫黃素 T(>75%,BS)  Thioflavin T  質(zhì)量規(guī)格：>75%,BS 小鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT1 ELISA Kit

硫藤黃素(>95%,BC)  Thiolutin from Streptomyces luteosporeus  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC 小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

硫堇(>90%,BS)  Thionin  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS 小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-2 ELISA Kit
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物價(jià)格Spongouridine  3083-77-0  中文名：阿糖尿苷  分子式：C9H12N2O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠溶菌酶試劑盒elisa試劑盒   小鼠溶菌酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠溶菌酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠溶菌酶試劑盒、小鼠溶菌酶試劑盒elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Soyacerebroside II  115074-93-6  中文名：大豆腦苷II  分子式：C40H75NO9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠尿激酶elisa試劑盒   小鼠尿激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠尿激酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠尿激酶試劑盒、小鼠尿激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Soyacerebroside I  114297-20-0  中文名：  分子式：C40H75NO9  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  抗?jié)?/span>; 番杏; 大豆; 大蒜; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠活化素elisa試劑盒   小鼠活化素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠活化素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠活化素試劑盒、小鼠活化素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Sorafenib tosylate  475207-59-1  中文名：索拉非尼  分子式：C28H24ClF3N4O6S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISAKit  

Sorafenib  284461-73-0  中文名：索拉非尼  分子式：C21H16ClF3N4O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)ELISAKit