熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：扇革蜱通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Rhipicentor spp.
貨號(hào)：EY-P7139

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

硬脂酸鋅5克  Rabbit50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

54-47-7-5’-吡哆醛(+4℃)Pyridoxal phosphate  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISA試劑盒人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

玉米素25克  HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

芐基甲基醚 Benzyl methyl ,98% 538-86-3 10G 通用試劑  人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

迷 Dimqthyl qtqr 112-10-6  兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)免疫試劑盒 Rabbit β-catenin,β-Cat ELISA Kit
肉浸液肉湯培養(yǎng)基25毫升2～8℃  大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒 Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit

(D-果糖)  CLIAKitforVC(HumanVitaminC)ELISAKit人維生素C規(guī)格：48T/96T

固鹽shēng huà shì jì容量：2～8°C50毫克  面食谷氨酰胺比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP  ELISAKitLTB人淋巴毒素β規(guī)格：48T/96T

苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑  小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 ，英文名： Bcl-2 ELISA Kit
加拿大樹(shù)香脂，英文名或英文縮寫：Canada balsam，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：1克  People / endotoxin lipopolysaccharide (LPS) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

硅酮　OV-101SILICONE OV-101  Humanmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

脆壁質(zhì)酶，英文名或英文縮寫：Lysozyme(Chinken egg)，級(jí)別：USP級(jí)，1：30000，規(guī)格：500克  HumanHydrocoisone,HYDELISA試劑盒人(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

睪酮 Testosterone,≥99.0% 58-22-0 1G 通用試劑  組織肌酸激酶(CK)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒25次

拂替卡松炳醋酯 Fluticcsonq propionctq(100Mg) 80474-14-  Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
扇革蜱通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒xy7noXYPROPYLmetxYLCELLULOSE羥丙基甲基纖維素高純級(jí)25G9004-65-3RT  Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISAKit人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

632-69-9虎紅鈉鹽Acid Red 94  人本周蛋白(BJP) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-AlaninemetxylEsterxy7nochloride鹽酸D-5克BR，98%  兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒 Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit

磺胺對(duì)甲氧嘧啶 Sulfameter,98% 651-06-9 5G 通用試劑  水通道蛋白4抗體(AQP-4 Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-4 Ab ELISA Kit

D-絲安醋;D-蠶絲安基醋;D-2-安基-3-羌基炳醋;D-β-羌基炳安醋 D-Sqrinq;D-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;D-β-xy7noxyclcninq;(R)-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;(R)-(-)-Sqrinq;D-3-xy7noxy-α-clcninq; 31-84-2  Pla25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒植物25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T