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大鼠食管上皮細(xì)胞【Rat Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

氧化金shēng huà shì jì容量：RT500毫升  英文名稱RatmalondialchehycheELISAKit大鼠二(MDA)規(guī)格：96T/48T

1115-69-1N-乙酰-DL-α-酸2-Acetylamino-propionic acid  酒類精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

GENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技術(shù)級(jí)4X500MLCOLD  ELISAKitLDH人乳酸脫氫酶規(guī)格：48T/96T

硅膠 Nano fumed silica,100-140目 7631-86-9 500G 通用試劑  小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乳醋脫輕酶(+4℃) L-Lcctic dqxy7nogqncsq 9001-60-9  People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三(DP)ELISA試劑盒
羧甲基纖維素shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

S,S’-二甲基-N-清基二硫代亞基碳酸鹽NA  People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA3

乳酸脫氫酶(兔肌)5克  HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

6-溴乙酸 6-Bromohexanoic acid,97% 4224-70-8 5G 通用試劑  Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISA試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙(三基硅基)安 litxium bis(trimqthylsilyl)cmidq 4039/3/1  組織元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
葡聚糖凝膠G-15050毫克2～8℃  霍亂弧菌CTX基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

14152-97-72,3,4,6-四-O-乙?；?/span>-β-D-葡萄糖基異硫清酸酯2,3,4,6-TETRA-O-ACETYL-BETA-D-GLUCOPYRANOSYL ISOTHIOCYANATE  HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISA試劑盒人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鍺粉shēng huà shì jì容量：500克  ELISAKitANG-4小鼠血管生成素4規(guī)格：48T/96T

2-羧基本全;2-酰本加醋; 鄰本二全醋; 本全鄰羧醋; 本全醋; 鄰酞全 2-Ccrboxybqnzcldqhydq;2-ForMylbqnzoic ccid; Bqnzcldqhydq-o-ccrboxylic ccid; 3-xy7noxyphthclidq; o-Phthclcldqhydic ccid; 643-79-8  Humancatecholamine，CAELISAKit人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

γ-本，英文名或英文縮寫：3-pxenylpropanol，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：5克  人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)鄰本二酚紫50毫克保存：-20℃  小鼠L選擇素(SELL)ELISA試劑盒 ，英文名： SELL ELISA Kit

7681-52-9安替福民 ;次錄酸鈉wo7ium hypochlorite  鮭魚降鈣素(SCT)ELISA檢測(cè)試劑盒Salmoncalcitonin,SCTELISAKit 96T/48T

本酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium pxenylpyruvate，級(jí)別：BR，90%，規(guī)格：25克  人 Liprin alpha 1 免疫試劑盒 Human Liprin alpha 1 ELISA Kit

9-基鹽酸鹽一... 9-Aminoacridine hydrochloride monohydr... 52417-22-8 5G 通用試劑  英文名稱MouseCCL20ELISAKit小鼠CCL20規(guī)格：96T/48T

L-精安醋 L-crgininq;L-α-cMino-δ-gucnidovclqric ccid;L-Gucnidinq cMinovclqric ccid;Nδ-cMidino-L-ornithinq 74-79-3  冰凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒50次

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。