人膀胱成纖維細(xì)胞提取物【Human Bladder:Normal Bladder Fibroblast Derivatives】 人膀胱成纖維細(xì)胞提取物是從人膀胱成纖維細(xì)胞提取的,人膀胱成纖維細(xì)胞從正常人膀胱組織制備。正常人膀胱組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 人膀胱成纖維細(xì)胞提取物 | Human Bladder:Normal Bladder Fibroblast Derivatives | EYX99011 |

我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
 實驗事項: 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 豬傳染性胃腸炎病毒TGEV快速檢測卡3-O-Methyl-Estrone162423-氧甲基基雌酮 豬衣原體抗原快速檢測卡Hydrocortisone3 禽鸚鵡熱衣原體快速檢測卡4-Androstenediol115624-雄烯二醇 禽法氏囊抗原快速檢測卡5α-Androstanedione84665α-雄甾烷二酮 禽法氏囊抗體快速檢測卡1-Testosterone1965/6/51-睪酮 Pepsin1:3000,PorcineSource 100g Androstanolone heptanoate 33776-88-4 中文名:雄諾龍庚酸酯 分子式:C26H42O3 People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒E 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 2479-46-1 中文名:1,3-雙(4-氨苯氧基)苯 分子式:C18H16N2O2 People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E 1,5-Pentanediol diacrylate 36840-85-4 中文名: 分子式:C11H16O4 People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E 1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C31H38O18 People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)ELISA試劑盒 澤瀉醇B HPLC≥98% 20mg Mouseai-humanD-PaothenicAcidmAb鼠抗人D-泛酸(PaothenicAcid)單抗0.1ml/0.2ml0.1ml/0.2ml 澤瀉醇B醋酸酯 HPLC≥98% 20mg Mouseai-IgEreceptoraibodyELISA試劑盒小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 澤瀉醇F HPLC≥98% 20mg Mouseai-IVIgGaibodyELISA試劑盒小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 獐牙菜苷 HPLC≥98% 20mg Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 獐牙菜苦苷 HPLC≥98% 20mg MouseAi-myocardialaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 樟腦 HPLC≥96% 100mg MouseAi-nuclearAibody,ANAELISA試劑盒小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 掌葉防已堿 HPLC≥98% 20mg Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA試劑盒小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蔗糖 HPLC≥98% 50mg Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA試劑盒小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 正十二烷酸巨大戟酯 HPLC≥98% 20mg Mouseai-redcellaibodyELISAKit小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 支脫皂苷元 HPLC≥98% 20mg Mouseai-redcellaibodyELISA試劑盒小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人膀胱成纖維細(xì)胞提取物Stanozolol 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 度:98.0% 小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒 Oxymetholone 中文名:康復(fù)龍 分子式:C21H32O3 度:98.0% 小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)ELISA試劑盒 Mebendazole 中文名:甲苯咪唑 分子式:C16H13N3O3 度:98.0% 小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S 度:98.0% 小鼠L苯解酶(PAL)ELISA試劑盒 Ornidazole 中文名:奧硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0% 小鼠KN-62ELISA試劑盒 |