大鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物【Rat Ureter: Normal Ureter Derivatives】

大鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代輸尿管上皮細(xì)胞提取的，大鼠原代輸尿管上皮細(xì)胞從正常大鼠輸尿管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

鵝源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提?。?/span>483-Allylrhodanine145773-烯丙基羅丹寧

兔源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提?。?/span>48Nandrolone laurate2641月桂酸諾龍

貂源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提?。?/span>48Androst-eneβ,17β-diol 3,17-diacetate996雄甾-烯β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯

牛羊源性成分通用單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提?。?/span>48Androstanolone heptanoate337768雄諾龍庚酸酯

狐貍源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提取）4811α-Hydroxyandrost-ene,17-dione564311α-羥基-雄甾-烯,17-二酮
Glycoursodeoxycholic acid  中文名：甘氨熊脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5    豬骨鈣素elisa試劑盒   豬骨鈣素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬骨鈣素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬骨鈣素試劑盒、豬骨鈣素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Glycodeoxycholic acid  中文名：甘氨脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5    豬睪elisa試劑盒   豬睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬睪試劑盒、豬睪eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4    豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit  

Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  中文名：  分子式：C29H58O5    豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISAKit  

Glycerol  中文名：甘油  分子式：C3H8O3    豬睪(T)ELISAKit
酸棗仁皂苷B1(標(biāo)準(zhǔn)品)  Jujuboside B1  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKIT 96T/48T

薯蕷皂苷A  Prosapogenin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)試劑盒 Rat free chorionic gonadoopin,f-βCG ELISA KIT

Rocilinostat (ACY-1215)  ACY1215  質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑 大鼠游離雌三醇(FE3)試劑盒 Rat free Esiol,FE3 ELISA Kit

肉豆蔻酸,十四烷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Myristic acid  質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T

肉豆蔻酸,十四烷酸  Myristic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥98%，BR 大鼠游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 Rat Free Testosterone,F-TESTO ELISA Kit

丁二酮肟(鎳試劑)  Dimethylglyoxime  質(zhì)量規(guī)格：AR 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 96T/48T

黃酮  Flavone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分 大鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit

依維菌素  Ivermectin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T

細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)  CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester  質(zhì)量規(guī)格：≥90%，用于熒光標(biāo)記 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒 Rat Free Prostate Specific Aigen,fPSA ELISA Kit

CAPE (咖啡酸苯乙酯)  CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠游離肉堿試劑盒 Rat Free Carnitine ELISA Kit
大鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit  3-Acetylcoumarin  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)血清、組織等）   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4 

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)全血）   Lactic acid (LD) test case (whole blood)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

乳酸（LD）（血清、組織）檢測(cè)   Lactic acid (LD) (whole blood) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

乳酸（LD）（全血）檢測(cè)   Lactate dehydrogenase (LDH) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙?；愣顾?/span>  分子式：C11H8O3

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。