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大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗原理等相關(guān)操作說明。
  大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物的詳細(xì)資料:

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物【Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠原代腎成纖維細(xì)胞提取的,大鼠原代腎成纖維細(xì)胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物

Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives

EYX99259

 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實(shí)驗事項:

1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項:

1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)RNA恒溫核酸檢測試劑盒(不含提?。?/span>24T/48TNandrolone undecylate8629十一酸諾龍

對蝦桃拉綜合癥病毒(TSVRNA恒溫核酸檢測試劑盒(不含提?。?/span>24T/48TNandrolone phenylpropionate6苯諾龍

對蝦副溶血性弧菌恒溫核酸檢測試劑盒(免提?。?/span>24T/48TNandrolone laurate2641月桂酸諾龍

蝦肝腸胞蟲(EHP)恒溫核酸檢測試劑盒(免提?。?/span>24T/48TNandrolone decanoate30癸酸諾龍

對蝦白斑綜合癥病毒(WSSVDNA恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TN-Aminophthalimide18758N-氨基
Glycodeoxycholic acid  360-65-6  中文名:甘氨脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  膽烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠巨噬細(xì)胞趨化蛋白-3   英文名稱:   monocyte chemotactic protein 3   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   MCP-3

Glyceryl hexacosanoate  127098-14-0  中文名:  分子式:C29H58O4  度:關(guān)鍵詞:    小鼠M-膽堿能受體結(jié)合力   英文名稱:   Mcholinoceptor binding capacity   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   MCBC

Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1  中文名:  分子式:C29H58O5  度:關(guān)鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠酸性0酸酶elisa試劑盒   小鼠酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Glycerol  56-81-5  中文名:甘油  分子式:C3H8O3  度:關(guān)鍵詞:    小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Glyburide  10238-21-8  中文名:格列本脲  分子式:C23H28ClN3O5S  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠Ⅰ型膠原N末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原N末端肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。
酸性藍(lán)40(>50%,BS)  Acid blue 40  質(zhì)量規(guī)格:>50%,BS 猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T

酸性品紅6B(>50%,BS)  Acid Red 6B  質(zhì)量規(guī)格:>50%,BS 猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA檢測試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T

B1(>98%,BR)  Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測試劑盒MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T

B2(>98%,BR)  Aflatoxin B2  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T

G1(>98%,BR)  Aflatoxin G1  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 猴胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒MonkeyInsulin,INSELISAKit 96T/48T

G2(>98%,BR)  Aflatoxin G2  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T

茜素黃R鈉鹽  Alizarin yellow R ,  salt  質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

D-阿洛糖(>98%,BR)  ALL, D-Allose  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T

α-D-葡萄糖-1--二鈉(>99.0%,BR)  alpha-D-Glucose-1-phosphate, di salt, hydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR 呼吸鏈依賴性化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20

α-甲基肉桂酸(>98%,BR)  alpha-Methylcinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 呼吸鏈依賴性化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20
大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物-吉染色劑   100ml  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式:C9H13NO  度:98.0%   

軟水硬度測定試劑盒   Water hardness determination kit  Physapruin A  155178-03-3  中文名:  分子式:C28H38O7  度:96.5%  關(guān)鍵詞:  毒性; 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

軟骨糖蛋白 39(YKL-40)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ondansetron  99614-02-5  中文名:昂丹司瓊  分子式:C18H19N3O  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

乳鐵蛋白( Lactoferrin    作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  3-Amino-2-naphthoic acid  5959-52-4  中文名:3-氨基-2-萘甲酸  分子式:C11H9NO2  度:98.0%   

乳糖   100g  3-Amino-2,6-piperidinedione hydrochloride  24666-56-6  中文名:  分子式:C5H9ClN2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 大鼠腎成纖維 細(xì)胞提取物
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