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小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
  小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物的詳細(xì)資料:

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

Mouse Kidney: Normal Renal Artery Derivatives

EYX99139

 

小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Kidney: Normal Renal Artery Derivatives

小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的,小鼠原代腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠腎動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項:

1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

牛免疫球蛋白酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Clorofene124--芐基苯酚

三聚胺殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Clopidol297氯吡多

沙丁胺醇?xì)埩裘嘎?lián)免疫檢測試劑盒Clopidogrel bisulfate13468硫酸氫氯吡格雷

磺胺甲基異噁唑殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Clevidipine butyrate1672211丁酸氯維地平

硝基咪唑類藥物殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Clerosterol glucoside12362赤桐甾醇葡萄糖苷
Losartan  114798-26-4  中文名:氯沙坦  分子式:C22H23ClN6O  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒  

Loroglossin  58139-22-3  中文名:  分子式:C34H46O18  度:97.0%  關(guān)鍵詞:  抗癡呆; 梧桐屬; 繡線菊屬; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(ASTELISA試劑盒           

Loratadine  79794-75-5  中文名:氯雷他定  分子式:C22H23ClN2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠鐵蛋白elisa試劑盒   小鼠鐵蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠鐵蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠鐵蛋白試劑盒、小鼠鐵蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Loperamide hydrochloride  34552-83-5  中文名:鹽酸洛哌丁胺  分子式:C29H34Cl2N2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Lonidamine  50264-69-2  中文名:氯尼達(dá)明  分子式:C15H10Cl2N2O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠糖化血紅蛋白elisa試劑盒   小鼠糖化血紅蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠糖化血紅蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖化血紅蛋白試劑盒、小鼠糖化血紅蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。
鹽酸阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)  Amiloride hydrochloride   質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: IgM ELISA Kit

35-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate  質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠球蛋白樣EGF樣域酪酸激酶1(Tie1)ELISA試劑盒 ,英文名: Tie1 ELISA Kit

苯噻啶(標(biāo)準(zhǔn)品)  Pizotifen  質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠苗條素(LEP)ELISA試劑盒 ,英文名: LEP ELISA Kit

β-環(huán)糊精(標(biāo)準(zhǔn)品)  β-Cyclodextrin  質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠苗條素(OB)ELISA試劑盒 ,英文名: OB ELISA Kit

卡托普利二硫化物(標(biāo)準(zhǔn)品)  Captopril Disulfide  質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠苗條素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 ,英文名: Leptin receptor ELISA Kit

氯羥喹(標(biāo)準(zhǔn)品)  Clioquinol  質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA檢測試劑盒MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 96T/48T

硫酸沙丁胺醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Albuterol sulfate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 ,英文名: LR/Ob-R ELISA Kit

硫酸普拉睪酮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dehydroepiandrosterone-3-sulfate  質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒 ,英文名: AMH ELISA Kit

撲米酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Primidone  質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-)ELISA檢測試劑盒Mouseannexin,ANX-ELISAKit 96T/48T

葡萄糖酸鋅(標(biāo)準(zhǔn)品)  Zinc gluconate  質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-)ELISA試劑盒 ,英文名: ANX- ELISA Kit
小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物二(MDA)檢測   Malondialdehyde (MDA) detection                 Xanthorin  17526-15-7  中文名:  分子式:C16H12O6 

二(MDA)測定試劑盒(TBA法)  Ranolazine dihydrochloride  95635-56-6  中文名:鹽酸雷諾嗪  分子式:C24H35Cl2N3O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Phenformin  114-86-3  中文名:苯乙雙胍  分子式:C10H15N5  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒   48T                 Phenformin  114-86-3  中文名:苯乙雙胍  分子式:C10H15N5 

多功能DNA化回收試劑盒   Multifunctional DNA purification and recycling Kit                 Axitinib  中文名:阿西替尼  分子式:C22H18N4OS

注意事項:

1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠腎動脈內(nèi)皮 細(xì)胞提取物
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