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小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)

小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)
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小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
  小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)的詳細(xì)資料:

小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物【Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives

小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代前列腺上皮細(xì)胞提取的,小鼠原代前列腺上皮細(xì)胞從正常小鼠前列腺組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 

產(chǎn)品名稱

小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)

英文名稱

Mouse Prostate: NormalProstate Derivatives

貨號(hào)

EYX99141

 

 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存:

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

牛結(jié)核抗體快速檢測(cè)卡7-Keto-dehydroepiandrosterone56697-酮基去氫表雄酮

布氏桿菌抗體快速檢測(cè)卡 prasterone sulfate997去氫表雄酮硫酸鈉鹽

小反芻獸疫抗體快速檢測(cè)卡Dehydroepiandrosterone enanthate239833普拉雄酮庚酸酯

犬瘟熱CDV快速檢測(cè)卡Boldenone cyclopentanepropionate6寶丹酮環(huán)戊酯

狂犬病抗原快速檢測(cè)卡Boldenone acetate23639寶丹酮醋酸酯
Lonidamine  中文名:氯尼達(dá)明  分子式:C15H10Cl2N2O2    豬傳染性胃腸炎病毒抗體(TGEVELISA試劑盒           

Lomefloxacin hydrochloride  中文名:鹽酸洛美沙星  分子式:C17H20ClF2N3O3    豬促卵泡素elisa試劑盒   豬促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬促卵泡素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬促卵泡素試劑盒、豬促卵泡素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Lithocholic acid  中文名:石膽酸  分子式:C24H40O3    豬促甲狀腺素釋放激素elisa試劑盒   豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒、豬促甲狀腺素釋放激素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Linderaspirone A  中文名:  分子式:C34H32O10    豬雌二醇受體elisa試劑盒   豬雌二醇受體試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬雌二醇受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬雌二醇受體試劑盒、豬雌二醇受體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Lincomycin hydrochloride  中文名:鹽酸林可霉素  分子式:C18H35ClN2O6S    豬傳染性胃腸炎病毒抗體elisa試劑盒   豬傳染性胃腸炎病毒抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬傳染性胃腸炎病毒抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬傳染性胃腸炎病毒抗體試劑盒、豬傳染性胃腸炎病毒抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。
鹽酸阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Arbidol HCl  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratmalondialchehyche,MDAELISA試劑盒大鼠二(MDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿加曲班  Argatroban  質(zhì)量規(guī)格:>99%,,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿加曲班(標(biāo)準(zhǔn)品)  Argatroban  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISA試劑盒大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

醋酸精氨酸加壓素  Argipressin Acetate  質(zhì)量規(guī)格:度98% RatMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISAKit大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿替洛爾  Atenolol  質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,USPgrade RatMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISA試劑盒大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Atenolol  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿托伐他汀鈣  Atorvastatin calcium  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ratmelanocyteaibody,MCAbELISA試劑盒大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿托伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)  Atorvastatin calcium  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatMelatonin,MT/MLTELISAKit大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷(進(jìn)分)  Azacitidine (5-Azacytidine)  質(zhì)量規(guī)格:> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385 RatMelatonin,MT/MLTELISA試劑盒大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷  Azacitidine (5-Azacytidine)  質(zhì)量規(guī)格:度> 98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatMetallothionein,MTELISAKit大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)封閉用正常山羊血清工作液  Ribavirin  36791-04-5  中文名:利巴韋林  分子式:C8H12N4O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

吩嗪甲酯   1g  Trenbolone acetate  10161-34-9  中文名:  分子式:C20H24O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式:C21H20O10 

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A   英文名稱:   Pulmonary surfacta associated protein type A   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SP-A  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式:C16H14O3  度:99.0%

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A(SP-A)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠前列腺上皮 細(xì)胞提取物
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