小鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物【Mouse Bladder: Normal Bladder Derivatives】

小鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代膀胱上皮細(xì)胞提取的，小鼠原代膀胱上皮細(xì)胞從正常小鼠膀胱組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

牛布氏桿菌病ELISA檢測(cè)試劑盒（間接法）19211α-Hydroxycanrenone1925697

牛布氏桿菌病cELISA檢測(cè)試劑盒（競(jìng)爭(zhēng)法）192Eplerenone772依普利酮

（注：競(jìng)爭(zhēng)法確證區(qū)分野毒和疫苗抗體）Flumethasone21357氟米松

牛結(jié)核桿菌病γ干擾素ELISA檢測(cè)試劑盒（確證）1923-Oxo-aza-alpha-androstane7β-carboxylic acid33355

牛結(jié)核桿菌抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（篩選）1923-(4-Chlorobutyl)indole-carbonitrile1436129
Lomefloxacin hydrochloride  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3  度：98.0%  小鼠多巴胺D1受體elisa試劑盒   小鼠多巴胺D1受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠多巴胺D1受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠多巴胺D1受體試劑盒、小鼠多巴胺D1受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Tetracycline  中文名：四環(huán)素  分子式：C22H24N2O8  度：97.0%  小鼠受體亞型elisa試劑盒   小鼠受體亞型試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠受體亞型試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠受體亞型試劑盒、小鼠受體亞型eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Sulfaguanidine  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S  度：99.0%  小鼠毒性休克綜合征elisa試劑盒   小鼠毒性休克綜合征試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠毒性休克綜合征試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠毒性休克綜合征試劑盒、小鼠毒性休克綜合征eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Gatifloxacin Mesylate  中文名：甲磺酸加替沙星  分子式：C20H26FN3O7S  度：98.0%  小鼠泛素蛋白elisa試劑盒   小鼠泛素蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠泛素蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠泛素蛋白試劑盒、小鼠泛素蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Flumequine   中文名：氟甲喹鈉  分子式：C14H11FNNaO3  度：98.0%  小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒
鹽霉素,沙利霉素  Salinomycin  質(zhì)量規(guī)格：assay 12%~24% 小鼠層粘連蛋白(LN)ELISA試劑盒 ，英文名： LN ELISA Kit

仙茅苷  Curculigoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠層粘連蛋白α1(LAMα1)ELISA試劑盒 ，英文名： LAMα1 ELISA Kit

丹皮酚原苷；牡丹酚原甙  Paeonolide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠層粘連蛋白β1(LAMβ1)ELISA試劑盒 ，英文名： LAMβ1 ELISA Kit

氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  oxysophoridine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)ELISA試劑盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit

一葉秋堿 ，一葉萩堿  Securinine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，對(duì)照品 小鼠叉頭框蛋白A2(FOXA2)ELISA試劑盒 ，英文名： FOXA2 ELISA Kit

遠(yuǎn)志口山酮；遠(yuǎn)志山酮III  Polygalaxanthone III  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠叉頭框蛋白M1(FOXM1)ELISA試劑盒 ，英文名： FOXM1 ELISA Kit

雷公藤定堿  Wtlfordine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠叉頭框蛋白O3(FOXO3)ELISA試劑盒 ，英文名： FOXO3 ELISA Kit

三基十四烷基氯化膦  Tributyltetradecylphosphonium chloride  質(zhì)量規(guī)格：50%grade 小鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)ELISA試劑盒 ，英文名： FOXP3 ELISA Kit

羅漢果皂苷ⅢA1  mogroside ⅢA1   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)ELISA試劑盒 ，英文名： FABP2 ELISA Kit

羅漢果皂苷ⅡA2  mogroside II A2  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T
小鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物說(shuō)明書甘油三酯（TG）含量測(cè)定試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣              Atractylodin  中文名：蒼術(shù)素  分子式：C13H10O 

甘油0酸   10g  Androstenediol-3-acetate  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3  度：98.0%

甘露聚糖結(jié)合凝集素絲酸肽酶-2   英文名稱：   mannan-binding lectin associated serine proteases   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MASP-2  3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  中文名：  分子式：C17H16ClIO2 

富組酸糖蛋白   英文名稱：   rich in histidine glycoprotein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HPRG  Norethindrone  68-22-4  中文名：炔諾酮  分子式：C20H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol  中文名：  分子式：C21H34O3

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。