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大鼠皮下脂肪細胞提取物【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat CellsDerivatives】

大鼠皮下脂肪細胞提取物是從大鼠原代皮下脂肪細胞提取的，大鼠原代皮下脂肪細胞從正常大鼠脂肪組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

動物/細胞基因組DNA提取試劑盒次6-Amino-methyl-nitrosouracil69728

酵母基因組DNA提取試劑盒次 6-Amino,3-dimethyluracil66421

昆蟲基因組DNA提取試劑盒次 6,7-Dihydroneridienone A729596

土壤基因組DNA提取試劑盒 次 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose6866156,6'- 二芥子?；崽?/span>

細菌基因組DNA提取試劑盒次6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41
Gliquidone  33342-05-1  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9elisa試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Glimepiride  93479-97-1  中文名：格列美脲  分子式：C24H34N4O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠酸性粒細胞趨化因子elisa試劑盒   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒、小鼠酸性粒細胞趨化因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齊特  分子式：C15H21N3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白elisa試劑盒   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白試劑盒、小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Glaucogenin C mono-D-thevetoside  849201-84-9  中文名：  分子式：C28H40O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠表皮調(diào)節(jié)素elisa試劑盒   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒、小鼠表皮調(diào)節(jié)素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Ginsenoyne K  141947-42-4  中文名：  分子式：C17H24O3  度：%  關(guān)鍵詞：    豚鼠神經(jīng)肽Aelisa試劑盒   豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒、豚鼠神經(jīng)肽Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
蘇丹藍II/溶劑藍35  Sudan Blue II/Solvent Blue 35  質(zhì)量規(guī)格：BS 大鼠*狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit

甲基紅  Methyl red  質(zhì)量規(guī)格：IND 大鼠色氨酸5羥化酶2(TPH2)試劑盒 Rat yptophan 5-hydroxylase 2,TPH2 ELISA kit

間甲基紅  m-Methyl red  質(zhì)量規(guī)格：IND 大鼠色氨酸羥化酶(TPH)試劑盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit

甲基紅鈉鹽/酸性紅2  Methyl Red  salt  質(zhì)量規(guī)格：IND 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測試劑盒Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T

西諾沙星；新惡酸  Cinoxacin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,進分 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒 Rat pigme epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit

19-去甲-4-雄烯二酮  Norandrostenedione  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)試劑盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit

達格列凈一水 ;達格列嗪水合物  Dapagliflozin propanediol hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA檢測試劑盒RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit 96T/48T

安塞曲匹/膽脂轉(zhuǎn)移蛋白阻滯劑  Anacetrapib;MK0859  質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit

達比加群酯  Dabigatran etexilate  質(zhì)量規(guī)格：>97% 大鼠神經(jīng)降壓素(S)試劑盒 Rat neurotensin,S ELISA kit

利伐沙班  Rivaroxaban  質(zhì)量規(guī)格：度≥98% 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Ratglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T
大鼠皮下脂肪細胞提取物說明書山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒              3-Benzalphthalide  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2 

山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit     3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

山羊β   英文名稱：   β-Hydroxybyrate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Β-OHB  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%

山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%   

山梨醇脫氫酶測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣  3-Aminopiperidine dihydrochloride  334618-23-4  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。