小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Coronary Artery：NormalCoronary Artery Derivatives】

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的，小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

內(nèi)酰胺酶 ELISA試劑盒96TN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰嗎啉

利巴韋林 ELISA試劑盒96TN-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143

沙拉沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzyladenine12149N6-芐基腺嘌呤

雙氟沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyladenine059N6-苯甲?；汆堰?/span>

桿菌肽 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyl'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)'-deoxyadenosine643258N6-苯甲?；?/span>'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)'-脫氧腺苷
L-Isoleucine   50g                 Vildagliptin  274901-16-5  中文名：維達(dá)列汀  分子式：C17H25N3O2 

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5  Vildagliptin  中文名：維達(dá)列汀  分子式：C17H25N3O2 

Lectin,fromiticumvulgaris                    Trenbolone heptanoate  N  中文名：  分子式：C25H34O3 

Lectin,fromArachisHypogaea(pean)  Trenbolone heptanoate  中文名：  分子式：C25H34O3 

Kisser封片液   10ml  Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2  度：98.0%
亞油酸膽酯(>95.0%(T))  Cholesterol Linoleate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)ELISA試劑盒 ，英文名： REG3α ELISA Kit

棕櫚酸膽酯(>97.0%(T))  Cholesterol Palmitate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA試劑盒 ，英文名： REG3γ ELISA Kit

正辛酸膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol n-Octanoate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠早期生長應(yīng)答因子1(EGR1)ELISA試劑盒 ，英文名： EGR1 ELISA Kit

油酸膽酯(>85.0%(GC))  Cholesterol Oleate  質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(GC) 小鼠早期生長應(yīng)答因子2(EGR2)ELISA試劑盒 ，英文名： EGR2 ELISA Kit

氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC))  Cholesteryl Chloride from Beef Fat  質(zhì)量規(guī)格：>87.0%(GC) 小鼠早期生長應(yīng)答因子4(EGR4)ELISA試劑盒 ，英文名： EGR4 ELISA Kit

反-肉桂酸膽酯(>96.0%(HPLC)(T))  Cholesterol trans-Cinnamate  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)(T) 小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit

癸酸膽酯  Cholesterol Decanoate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit

氫化肉桂酸膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Hydrocinnamate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA檢測試劑盒MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T

膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Laurate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5AC ELISA Kit

豆蔻酸膽酯(>98.0%(T))  Cholesterol Myristate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)干細(xì)胞因子受體 (SCF R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重樓皂苷VII  分子式：C51H82O21 

干細(xì)胞因子受體   英文名稱：   stem cell factor receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SCF R  Parecoxib   198470-85-8  中文名：帕瑞考昔鈉  分子式：C19H17N2NaO4S 

干細(xì)胞因子 (SCF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重樓皂苷VII  分子式：C51H82O21  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

干細(xì)胞因子   英文名稱：   stem cell factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SCF  Parecoxib   198470-85-8  中文名：帕瑞考昔鈉  分子式：C19H17N2NaO4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

干擾素α受體   英文名稱：   Human Ierferon α Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IFNαR  Pramipexole dihydrochloride  104632-25-9  中文名：鹽酸普拉克索  分子式：C10H19Cl2N3S