PrimaCell™小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA檢測試劑盒BovineCiateSyhetase,CSELISAKit 96T/48T  80681-45-4升麻素苷  Prim-O-glucosylcimifugin

人alpha-1能受體(ADRA1)IgG抗體試劑盒 人alpha-1能受體(ADRA1)IgG抗體ELISA Kit  27994-11-2升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷說明書  Cimigenol-3-O-β-D -xylpyranoside

英文名稱MouseIerleukin-2ELISAkit小鼠白介素2(IL-2)規(guī)格：96T/48T  22910-60-7銀杏酸（C15：1）品牌  Ginkgolic Acid (C15:1)

冰凍切片總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50  161207-05-2升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷規(guī)格  Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside

RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA試劑盒大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  13463-28-0圣草苷  Eriocitrin
43043-74-9去氧紫草素  Deoxyshikonin    載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

42719-32-4具棲冬青苷說明書  Pedunculoside  載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

4261-42-1異葒草苷規(guī)格  Isoorientin  載玻片細(xì)胞細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

42553-65-1西紅花苷規(guī)格  Crocin  載玻片細(xì)胞鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

4233-96-9沒食子兒茶素沒食子酸酯規(guī)格  GCG；Epigallocatechin gallate  載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗體 試劑盒 Human Candida Albicans(C.albicans)IgE aibody ELISA Kit  110623-73-9朝藿定B規(guī)格  Epimedin B

Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  110642-44-9朝藿定C  Epimedin C

載玻片細(xì)胞EGFR蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  7212-44-4橙花叔醇說明書  Nerolidol

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  67979-25-3橙黃決明素品牌  Aurantio-obtusin

小鼠組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒 ，英文名： H2B ELISA Kit  520-26-3橙皮苷規(guī)格  Hesperidin
PrimaCell™小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)487-41-2連翹苷  Phillyrin  植物維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminD,VDELISAKit 96T/48T

4871-97-0莪術(shù)醇說明書  Curcumol   植物維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒PlaHumanVitaminC,VCELISAKit 96T/48T

486-90-8黃華堿說明書  Thermopsine   植物維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T

486-86-2N-甲基野靛堿  N－Methylcytisine   植物維生素B12(VB12)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T

486-66-8大豆苷元規(guī)格  Daidzein   植物維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。