我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 大鼠角膜上皮細(xì)胞提取物說明書 | Rat Eye: Normal Corneal Epithelial CellsDerivatives | EYX99270 |

大鼠角膜上皮細(xì)胞提取物【Rat Eye: Normal Corneal Epithelial CellsDerivatives】 大鼠角膜上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代角膜上皮細(xì)胞提取的,大鼠原代角膜上皮細(xì)胞從正常大鼠眼組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
 實(shí)驗(yàn)事項(xiàng): 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。 6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。 7. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。 單純皰疹病毒Ⅱ型核酸檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)盒Sulfamonomethoxine 3068磺胺間甲氧嘧啶鈉 細(xì)菌耐藥基因KPC檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)盒Sulfamethoxazole7236磺胺甲噁唑 人感染H7N9病毒RNA檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)盒Sulfamethazine578磺胺二甲嘧啶 淋球菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)盒Sulfaguanidine577磺胺脒 解脲脲原體核酸檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針法)盒Sulfadiazine685磺胺嘧啶 Ganciclovir 82410-32-0 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4 HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Oxiracetam 62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次 Piracetam 7491-74-9 中文名:吡拉西坦 分子式:C6H10N2O2 HumanpodocinELISAKit人PodocinELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Fudosteine 13189-98-5 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 豚鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-α ELISA Kit Betaxolol hydrochloride 63659-19-8 中文名:鹽酸倍他洛爾 分子式:C18H30ClNO3 Human lung cancer marker DR-70 (DR-70TM) ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒 四螨嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Clofentezine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6% 犬黃體生成素(LH)試劑盒 Canine Leinizing Hormone,LH ELISA Kit 四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) Clofentezine solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4% 犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T 四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Clofentezine solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6% 犬肌酐(Cr)試劑盒 Canine Creatinine,CR ELISA KIT 萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Carboxine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9% 犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T 環(huán)己醇(Standard for GC,>99.0%(GC)) Cyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.0%(GC) 犬肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒 Dog Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit 敵草索(標(biāo)準(zhǔn)品) Dacthal 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Canine Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit 1-氯辛烷(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Chlorooctane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit 十二烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Dodecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC) 犬基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit 鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體: 5%HNO3) Bismuth solution 質(zhì)量規(guī)格:100mg/L,基體: 5%HNO3 犬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) Copper solution 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 犬基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 Dog Maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit 大鼠角膜上皮細(xì)胞提取物說明書神經(jīng)絲蛋白 英文名稱: neurofilame protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NF Tetracaine 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 神經(jīng)絲蛋白 英文名稱: neurofilame protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NF Tetracaine 94-24-6 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體 英文名稱: nerve growth factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGFR 3'-Hydroxygynuramide II 1401093-57-9 中文名: 分子式:C42H83NO6 神經(jīng)生長(zhǎng)因子 英文名稱: nerve growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGF 3'-Hydroxygynuramide II 1401093-57-9 中文名: 分子式:C42H83NO6 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 3-Hydroxychimaphilin 33253-99-5 中文名:3-羥基梅笠草素 分子式:C12H10O3 注意事項(xiàng): 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 |