PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

總脂酶測(cè)試盒【脂蛋白脂酶(LPL)shēng huà shì jì容量：RT1000支/包  奶品維生素E高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

(腦心浸液  ELISAKitHLA-G人類白細(xì)胞抗原G規(guī)格：48T/96T

TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超純級(jí)1.6LRT  小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒 ，英文名： APLN ELISA Kit

碳醋銨 cMMoniuM ccronctq (cS);Crystcl cMMonic 206-87-6  人preptinELISA檢測(cè)試劑盒HumanpreptinELISAKit 96T/48T

雙炳同炳烯酰安 Diccqtonq ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)-2-propcncMidq 873-97-4  大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)免疫試劑盒 Rat gap junction protein,alpha 1,43kDa(GJA1)ELISA kit
鹽酸三shēng huà shì jì容量：5克  HumanImmunoglobulinA，IgAELISAKit人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

36546-50-6N-乙酰-L-酪酸乙酯;N-乙酰-L-3-(對(duì)羥基本)乙酯N-Acetyl-L-tyrosine etxyl ester;ATEE  人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-天冬酸1公斤  豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit

雌馬酚 Equol,98% 531-95-3 250MG 通用試劑  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

乳醋　2-8℃ L-LcCTIC cCID litxium ScLT 7848-80-  humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4,LILRB4ELISA試劑盒人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)500克RT  rabbitCoicosterone,COELISA試劑盒皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

10101-53-8溶液Chromic sulfate  HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖凝膠LH-60250毫克  Humancarbonicanhydrase2，CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-苯 4-Iodoanisole,98% 696-62-8 25G 通用試劑  人NOD樣受體(NLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

三錄螨醇 Dicofol 112-3-  兔抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit
PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒價(jià)格瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量：20KU  大鼠兒茶酚胺(CA)免疫試劑盒 Rat catecholamine,CA ELISA Kit

POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597  CLIAKitfoX-A2(HumahromboxaneA2)ELISAKit人血栓素A2規(guī)格：48T/96T

尿苷二嶙酸葡糖醛酸1克RT  牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2次

6-錄嘌呤 6-Chloropurinq 1987/4/3  ELISAKitsEM-1人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1規(guī)格：48T/96T

EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水蛋白組學(xué)級(jí)1KG6381-92-6RT  小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL1α1 ELISA Kit

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。