小鼠腸微血管細胞提取物【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives】 小鼠腸微血管細胞提取物是從小鼠腸微血管細胞提取的,小鼠腸微血管細胞從正常小鼠腸微血管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠腸微血管細胞提取物培養(yǎng) | 英文名稱 | Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives | 貨號 | EYX99149 |

實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 貓皰疹病毒1型實時熒光PCR檢測試劑盒Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside1714225 兔瘟RT-PCR檢測試劑盒/Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside1714222 支原體PCR檢測試劑盒Ornidazole167732奧硝唑 衣原體實時熒光PCR檢測試劑盒Ophiopogonin D9456194麥冬皂苷D 哺乳動物呼腸孤病毒實時熒光RT-PCR檢測試劑盒Ondansetron996142昂丹司瓊 Levamisole hydrochloride 中文名:鹽酸左旋咪唑 分子式:C11H13ClN2S 豬蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 Lenalidomide 中文名:來那度胺 分子式:C13H13N3O3 豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 Leflunomide 中文名:來氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒 L-Dihydroorotic acid 中文名:L-4,5-二氫乳清酸 分子式:C5H6N2O4 豬凋亡相關(guān)因子elisa試劑盒 豬凋亡相關(guān)因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬凋亡相關(guān)因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬凋亡相關(guān)因子試劑盒、豬凋亡相關(guān)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 L-Carnosine 中文名:L-肌肽 分子式:C9H14N4O3 豬地塞米松elisa試劑盒 豬地塞米松試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬地塞米松試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬地塞米松試劑盒、豬地塞米松eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 血紅素(>95%,BR) Hematin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 動物源性食品山羊源試劑盒20 聚乙二醇800 PEG 800 質(zhì)量規(guī)格:BR 動物源性食品鼠源試劑盒20 炔雌醚;炔雌醇環(huán)戊醚 Quinestrol 質(zhì)量規(guī)格:USP 動物源性食品鴨源試劑盒20 二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC) Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom 質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC 動物源性食品羊源試劑盒20 化丙啶(>95% (HPLC),BC) Propidium iodide 質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BC 動物源性食品豬源試劑盒20 十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,Tech Grade 動物源性飼料牛源試劑盒20 硅酸鈉九水(>98%,BR) silicate hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動物源性飼料羊源試劑盒20 5--3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) Bluo-Gal 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動物源性飼料樣品處理試劑盒20 氫二鈉二水 Di hydrogen phosphate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 動物脂肪組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 中性蛋白酶 Neutral Protease from Bacillus polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:酶活:20萬u/g 動物直腸組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 小鼠腸微血管細胞提取物培養(yǎng)谷酰胺、谷酸(兩種均可測) Glamine and glamic acid (two can be measured) 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 中文名: 分子式:C23H37N3O5 谷酰胺 英文名稱: ansglaminase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TG p-Nitrohydrocinnamic acid 16642-79-8 中文名: 分子式:C9H9NO4 谷酸測試盒 Glamate test kit 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 中文名: 分子式:C23H37N3O5 度:98.0% 谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒 谷胱甘肽還原酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 谷胱甘肽還原酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:谷胱甘肽還原酶試劑盒、谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Venlaine hydrochloride 99300-78-4 中文名:鹽酸文拉法辛 分子式:C17H28ClNO2 |