小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Vascular: Normal Vascular Endothelial Cell Derivatives】 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的,小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠血管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物說(shuō)明書(shū) | 英文名稱 | Mouse Vascular: Normal Vascular Endothelial Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99150 |

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 貓泛白細(xì)胞減少癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒/Otophylloside T164264 貓泛白細(xì)胞減少癥病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒Otophylloside O13265838 貓杯狀病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Otophylloside F22173青陽(yáng)參苷F 貓杯狀病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Otophylloside B67584青陽(yáng)參苷B 貓皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒/Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside16014 Lenalidomide 191732-72-6 中文名:來(lái)那度胺 分子式:C13H13N3O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子樣弱凋亡因子(TWEAK)ELISA試劑盒 Leflunomide 75706-12-6 中文名:來(lái)氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 L-Dihydroorotic acid 5988-19-2 中文名:L-4,5-二氫乳清酸 分子式:C5H6N2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 L-Carnosine 305-84-0 中文名:L-肌肽 分子式:C9H14N4O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit Latinone 79157-36-1 中文名: 分子式:C22H16O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISAKit 血根堿 HPLC≥98% 20mg HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血竭素 HPLC≥98% 20mg Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血竭素高氯酸鹽 HPLC≥98% 20mg humanUDP-glucoseceramideglucosylansferaseELISAKit人尿苷二0酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鴉膽子素D HPLC≥98% 20mg HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長(zhǎng)激素(US-GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鴨腳樹(shù)葉堿 HPLC≥98% 5mg HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雅姆皂苷元 HPLC≥98% 10mg humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 亞苯甲酰基脲 HPLC≥98% 20mg HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit人高敏*狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 亞麻木酚素 HPLC≥98% 20mg humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 亞麻酸乙酯 GC≥98% 20mg humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 亞油酸 GC≥98% 0.2ml HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物說(shuō)明書(shū)骨堿性0酸酶 英文名稱: bone alkaline phosphatase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): BALP Otophylloside B 106758-54-7 中文名:青陽(yáng)參苷B 分子式:C49H78O16 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 抗癲癇; 青陽(yáng)參; 孕甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 骨鈣素 英文名稱: Osteocalcin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): OC Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside 中文名: 分子式:C41H58O14 骨成型蛋白-4 英文名稱: Bone morphogenetic protein-4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): BMP-4 Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 骨成型蛋白-2 英文名稱: Bone morphogenetic protein-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): BMP-2 Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 度:98.0% 谷酰胺測(cè)試盒 Glamine test kit 3-Methylami-(2-thienyl)-1-propanol 116539-55-0 中文名: 分子式:C8H13NOS |