小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells Derivatives】

小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的，小鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氯羥吡啶殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cyproterone acetate4271醋酸環(huán)丙氯地孕酮

葉酸酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cyproheptadine hydrochloride9693鹽酸賽庚啶

維生素B12酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cynatratoside A973996白薇苷A

類藥物殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cynanoside F1002

孔雀石綠殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone13223
Lamivudine  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S  度：98.0%  兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit  

Stavudine  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISAKit  

Albendazole  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S  度：98.5%  兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISAKit  

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P  度：98.0%  兔過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit              

8-Phenyloctanol  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O  度：98.0%  兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒
化膽,從牛脂來(lái)(>98.0%(T))  Cholesteryl Bromide from Beef Fat  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC7 ELISA Kit

膽壬酸酯(>89.0%(GC))  Cholesterol Pelargonate  質(zhì)量規(guī)格：>89.0%(GC) 小鼠粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit

膽壬基碳酸酯  Cholesterol Nonyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit

膽庚基碳酸酯  Cholesterol Heptyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC4 ELISA Kit

膽油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))  Cholesterol Oleyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC) 小鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5AC ELISA Kit

膽甲基碳酸酯(>80.0%(GC))  Cholesterol Methyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>80.0%(GC) 小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit

膽乙基碳酸酯(>94.0%(GC))  Cholesterol Ethyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC) 小鼠長(zhǎng)停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)ELISA試劑盒 ，英文名： gas-6 ELISA Kit

膽異丙基碳酸酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Isopropyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠著絲粒蛋白H(CENPH)ELISA試劑盒 ，英文名： CENPH ELISA Kit

膽丁基碳酸酯  Cholesterol Butyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠真核翻譯起始因子2α激酶3(EIF2αK3)ELISA試劑盒 ，英文名： EIF2αK3 ELISA Kit

膽異丁基碳酸酯  Cholesterol Isobutyl Carbonate  質(zhì)量規(guī)格： 小鼠整合素α1(ITGα1)ELISA試劑盒 ，英文名： ITGα1 ELISA Kit
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物價(jià)格環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cAMP  Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7 

環(huán)0酸鳥(niǎo)苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP  vibo-Quercitol  488-76-6  中文名：  分子式：C6H12O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AIL R1  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 3(AIL R3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Arbidol hydrochloride  中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 1(AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Arbidol hydrochloride  中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S  度：98.0%

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。