小鼠滑膜組織提取物【Mouse Bone Joint: Normal Synovial Derivatives】

正常小鼠滑膜組織主要功能：（1）產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān)。（2）是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠滑膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Hygromycin B潮霉素B溶液   ml 0元11,12-Di-O-acetyltenacigenin B8578971

IAA/吲哚乙酸   1g/5g 1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene73481,8-雙二甲氨基萘

IBA/吲哚丁酸   1g/5g 1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-methanol8158

Imidazole 咪唑   0g1,6-Dibromopyrene2797391,6-二溴芘

INT 硝基四唑紫   2mg/0元1,6-Anhydro-β-D-glucose49871,6-脫水-β-D-葡萄糖
Deoxycholic acid  83-44-3  中文名：去氧膽酸  分子式：C24H40O4    Human neonatal thyroid stimulating hormone (N-TSH) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒

Timosaponin AIII  41059-79-4  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13    Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Diosgenin  512-04-9  中文名：薯蕷皂苷元  分子式：C27H42O3    HumanEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒人腺來(lái)源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Sarsasapogenin  126-19-2  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3    組織PIM2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Makisterone A 20,22-monoacetonide  245323-24-4  中文名：  分子式：C31H50O7    humanPepsinogenA,PG-AELISAKit人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,,基體:1%HNO3)  Lead standard  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,,基體:1%HNO3 牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit

镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl)  Lutetium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10%HCl 牛雙氫睪酮(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit

鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  Molybdenum standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 牛羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit

鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體: 1%HCl)  Molybdenum standard  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體: 1%HCl 牛胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PGF)試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit

水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品)  Nickel standard  質(zhì)量規(guī)格：濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit

鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  Niobium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 牛甜菜堿-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)試劑盒 Bovine Betaine--homocysteine S-methylansferase 1,BHMT ELISA kit

鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)  Nickel Standard  質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL，基體:1%HNO3 牛銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCeruloplasmin,CPELISAKit 96T/48T

鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)  Potassium standard  質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水 牛銅藍(lán)蛋白(CP)試劑盒 Bovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit

鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體:1%HCl)   Potassium Solution  質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體:1%HCl 牛銅鋅-過(guò)氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)試劑盒 Bovine Cu/Zn-Superoxide Dismase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit

鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  Praseodymium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 牛褪黑素(MT)試劑盒 Bovine melatonin,MT ELISA Kit
小鼠滑膜組織提取物腦素elisa試劑盒   腦素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   腦素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：腦素試劑盒、腦素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S 

腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒     9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene  153715-08-3  中文名：9,10-雙(3,5-二羥苯基)蒽  分子式：C26H18O4 

腦素/腦尿肽(BNP)ELISAKit     8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

腦素/腦尿肽(BNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  中文名：1,4-苯并二氧六環(huán)-6-羧酸  分子式：C9H8O4  度：98.0%

球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒     8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。