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產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 狗腎細(xì)胞；Super Tube圖片
形態(tài)特性上皮細(xì)胞

生長特性貼壁生長

特征特性從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK(ATCCCCL-34)，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株SuperTube。當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時，Supertube

成大量的小管(據(jù)報道，24孔板的每孔鋪7x105細(xì)胞，３天內(nèi)就能

成小管)。要

成小管，細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細(xì)胞株相比，SuperTube的c-AMP的檢測水平低得多，在forskolin刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低；它的跨上皮抗性也比SuperDome(ATCCCRL-2286)和

培養(yǎng)條件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況PN5

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

冷凍保存細(xì)胞之方法：
狗腎細(xì)胞；Super Tube圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）狗腎細(xì)胞；Super Tube圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞

CD40LG Others Mouse 小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

OK負(fù)鼠腎細(xì)胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細(xì)胞)
狗腎細(xì)胞；Super Tube圖片CL-0338G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

Eca-109人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBS

IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)

NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)
注意事項：
?1.一般客戶拿到狗腎細(xì)胞；Super Tube圖片后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。