小鼠成骨組織提取物【Bone: Normal Mouse Bone Derivatives】

骨組織是一種堅(jiān)硬的結(jié)締組織，是由細(xì)胞、纖維和基質(zhì)構(gòu)成的。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠成骨組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

HBV核酸及YMDD變異檢測(cè)試劑盒（基因芯片法）盒Rubiadin 1-methyl ether743甲基異茜草素-

結(jié)核桿菌感染T細(xì)胞診斷試劑盒（免疫斑點(diǎn)法）24人份/盒Rubanthrone A44176

核分枝桿菌IgG抗體檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光蛋白芯片法）人份/盒rsodeoxycholic acid1283熊去氧膽酸

豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）株Royleanone68127

豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）株Rosuvastain Calcium149瑞舒伐他汀鈣
Dehydroherbarin  36379-74-5  中文名：  分子式：C16H14O5    球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Herbarin  36379-67-6  中文名：  分子式：C16H16O6    Human costimulatory molecular receptor (CMR) ELISA Kit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒

Colelomycerone A  1191896-73-7  中文名：  分子式：C17H18O6    HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Herbaridine B  1151511-05-5  中文名：  分子式：C17H20O6    HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISA試劑盒人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Shiraiachrome A  124709-39-3  中文名：  分子式：C30H26O10    組織PAK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
芪偶氮  Stilbazo  質(zhì)量規(guī)格：鋁和其他金屬等用分光光度試劑 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanflagellinELISAKit 96T/48T

熒光鎵試劑(>98.0%(T))  Lumogallion   質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 人鞭毛蛋白(flagellin)試劑盒 Human flagellin ELISA Kit

浴酮靈二磺酸二鈉鹽  Di Bathocuproinedisulfonate  質(zhì)量規(guī)格：用于血液中銅的測(cè)定 人變(MN)試劑盒 Human metanephrine,MN ELISA Kit

水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物  Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Di Salt Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：用于亞鐵離子的測(cè)定 人表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(RCAS1)試劑盒 Human RCAS1 ELISA kit

浴銅靈 (升華提)(>99.0%(HPLC)(T))  Bathocuproine (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T) 人表睪酮試劑盒 Human Epitestosterone ELISA Kit

紅菲繞啉(升華提)(>99.0%(HPLC)(T))  Bathophenanthroline (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T) 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit 96T/48T

浴銅靈(>98.0%(T))  Bathocuproine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 96T/48T

新亞銅試劑半水合物(>98.0%(T))  Neocuproine Hemihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 人表面膜球蛋白D(mIgD)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 96T/48T

紅菲咯啉(>99.0%(T))  Bathophenanthroline  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T) 人表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit 96T/48T

4,7-二羥基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC))  4,7-Dihydroxy-1,10-phenanthroline  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 人表皮角蛋白(EK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanepidermalkeratin,EKELISAKit 96T/48T
小鼠成骨組織提取物培養(yǎng)內(nèi)皮抑素(ES)ELISAKit     8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O 

內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  中文名：  分子式：C31H38O18  度：98.0%

內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒              8-Phenyloctanol  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O 

內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit     9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol  中文名：  分子式：C18H26O3  度：%

內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,5-Pentanediol diacrylate  36840-85-4  中文名：  分子式：C11H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。