冷凍保存細(xì)胞之方法: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書 形態(tài)特性成纖維細(xì)胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性3T3-L1是從3T3細(xì)胞(Swissalbino)中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;可產(chǎn)生甘油三酯,高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。 培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS 傳代方法1:3傳代;3-4天一次 傳代情況PN3 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測熒光法(-) STR- 同工酶 染色體68-72
 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL COLEC11 Others Mouse 小鼠 CL-K1 / COLEC11 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM 猴源細(xì)胞 T細(xì)胞白血病,6T-CEM細(xì)胞 COLO-320(結(jié)腸腺癌細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 GHR Others Mouse 小鼠 GHR / GHBP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書牛白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 人關(guān)聯(lián)鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子2(TACSTD2)免疫試劑盒 Human TACSTD2 ELISA Kit 磷酸酶PP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CIP2A ELISA Kit RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumancomplemefactorD,CFDELISA試劑盒人補(bǔ)體因子D(CFD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanFibrinogenDegradationProduct,F(xiàn)DPELISAKit人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1說明書貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多小鼠源細(xì)胞。 |