小鼠腦動(dòng)脈血管組織提取物【Brain: Normal Mouse Cerebral Vascular Derivatives】

腦組織是指包容在顱腔內(nèi)的三大塊神經(jīng)纖維組織：大腦、腦干和小腦。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腦動(dòng)脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

GuHCl 鹽酸胍   2g/0g16-Acetoxy-O-acetylhorminone2697429

Heparin  肝素鈉   1g 15,16-DihydroxyoctadecaZ,12Z-dienoic acid11292

HEPBS   25g14β,16β-Dihydroxyβ-(β-D-glucopyranosyloxy)α-bufa0,22-dienolide13239524

HEPES   25g/g/0g12-Hydroxyjasmonic acid1631712-羥基茉莉酸

HEPPS   g/25g12-Aminolauric acid693712-氨基十二酸
Dehydroepiandrosterone  53-43-0  中文名：脫氫表雄酮  分子式：C19H28O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit  

Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6  中文名：  分子式：C42H62O17  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit  

Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside  144223-70-1  中文名：  分子式：C36H52O13  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  夾竹桃; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISAKit              

Dehydroadynerigenin digitaloside  52628-62-3  中文名：  分子式：C30H42O8  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒  

Deflazacort  14484-47-0  中文名：地夫可特  分子式：C25H31NO6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒
漆黃素； 紫鉚素 HPLC≥98% 20mg RatInsulin,INSELISA試劑盒大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫杉脂素 HPLC≥95% 20mg Ratinsulinaoaibodies,IAAELISAKit大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異葉波羅蜜環(huán)黃酮素 HPLC≥95% 20mg Ratinsulinaoaibodies,IAAELISA試劑盒大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

原千金藤那布任堿 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雪松素 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異魚藤色烯異黃酮 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫氧阿枯明 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧基白屈菜季銨堿 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

掌葉半夏堿戊 HPLC≥95% 20mg RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸藥根堿 HPLC≥98% 20mg RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠腦動(dòng)脈血管組織提取物價(jià)格皮質(zhì)/上腺(CO)ELISAKit                 9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  中文名：9-羥基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3 

凝血因子Ⅱelisa試劑盒   凝血因子Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   凝血因子Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：凝血因子Ⅱ試劑盒、凝血因子Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  中文名：  分子式：C18H26O4  度：%

凝血因子Ⅱelisa試劑盒   凝血因子Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   凝血因子Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：凝血因子Ⅱ試劑盒、凝血因子Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene  中文名：9,10-雙(3,5-二羥苯基)蒽  分子式：C26H18O4  度：98.0%

凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒     9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2  度：98.0%

凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit     9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2  度：98.0%