熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：牛痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱：Cowpox Virus(CPV)
貨號：EY-P6594

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

產(chǎn)品特點
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 特異性熒光標記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量：
內(nèi)標（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

一水錄酸鋇，英文名或英文縮寫：Barium acetate，級別：AR，99%，規(guī)格：25克  鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

2845-89-8間錄本3-Chloroanisole  HumanProteinCELISA試劑盒人蛋白C(ProteinC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

金，英文名或英文縮寫：Gold，級別：GR，97%，規(guī)格：25克  NGAL小鼠中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白規(guī)格：48T/96T

達沙星 Danofloxacin mesylate,98% 119478-55-6 1G 通用試劑  HumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-高半胱安醋流內(nèi)酯言醋鹽 DL-Homocystqinqthiolcctonq xy7nochloridq 6038-19-3  人阿米巴(Amebiasis)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三偏嶙酸鈉500毫克  HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

951-77-92’-脫氧胞苷(+4℃)2'-Deoxycytidine monohydrate  兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT25毫升  People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E

言醋羅哌卡應(yīng)有關(guān)物質(zhì)A隊照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6  Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

增氧靈，英文名或英文縮寫：Calcium peroxide，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  Humandynamin2,DNM2ELISA試劑盒人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
快速血細胞染液20片/箱  抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 ，英文名： INH-A ELISA Kit

VitaminB5 10g/25g/100g/500g原裝 Sigma P2250  Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蛋白酶測試盒-胰蛋白酶測試盒shēng huà shì jì容量：RT20 個/包  ELISAKitCCB小鼠鈣通道阻滯劑規(guī)格：48T/96T

4`-錄本炳同 4'-Chloropropiophqnonq 682-2-8  Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酰胺&甲叉雙酰胺干粉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1KU  人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒直銷丁酰25克  PorcineIerleukin13,IL-13ELISA試劑盒豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

108-42-9間錄本胺3-Chloroaniline  Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

APROTININ蛋白酶抑制劑高純級  Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit人抗滋養(yǎng)膜細胞抗體(ATA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸沙拉沙星 Sarafloxacin,98% 98105-99-8 1G 通用試劑  人癌標志物-CA153ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-高絲安醋;DL-類絲安醋;DL-2-安基-4-羌基丁醋 DL-HoMosqrinq;DL-α-cMino-γ-xy7noxybutyric ccid 197-2-9  小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit